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基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 小鼠主動脈內(nèi)皮細(xì)胞直銷
簡稱：MAEC

種屬：小鼠

來源：主動脈；內(nèi)皮細(xì)胞

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE0819

使用方法：
收到細(xì)胞小鼠主動脈內(nèi)皮細(xì)胞直銷后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達到80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

紫脲酸5克  小鼠Apelin小鼠13蛋白(AP13)ELISA試劑盒 ，英文名： AP13 ELISA Kit

(預(yù)雜交液)  人膠原酶I(CollagenaseI)ELISA檢測試劑盒HumanCollagenaseIELISAKit 96T/48T

五水亞嶙酸鈉，英文名或英文縮寫：wo7ium phosphite dibasic pentahydrate，級別：BR，95%，規(guī)格：100克  大鼠復(fù)制蛋白A 70kDaDNA結(jié)合亞基(RPA1)免疫試劑盒 Rat replication protein A 70 kDa DNA-binding subunit,RPA1 ELISA kit

1本隆 ;賽本隆 5-Phqnylccrbcmoylcmino-1,2,3-thicdiczolq 21707-22-  CLIAKitforUU-Ab(HumanUreaplasmaurealyticumaibody)ELISAKit人解脲脲原體抗體規(guī)格：48T/96T

1,4-氧氮雜環(huán)已烷，英文名或英文縮寫：Morpholine，級別：2N，200-300目，規(guī)格：25毫克  離子膜通道轉(zhuǎn)運功能檢測試劑盒20次
微量可調(diào)移液器P20shēng huà shì jì容量：5克  Mouseamyloidbetapeptide1-42,Aβ1-42ELISA試劑盒小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(電泳等電點標(biāo)準(zhǔn)PH2.5-6.5)  ELISAKitMCP-3/CCL7小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3規(guī)格：48T/96T

L-脯酰胺25克  Hamstehyroxine-BindingGlobulinAssay,TBGELISAKit倉鼠甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

9-基 9-Mqthylcnthrccqnq 779-0-  人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3 Ab-IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

FERROUSSULFATE,ANxy7noUS亞鐵,無水美國藥典級1KG7720-78-7RT  小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)免疫試劑盒 Mouse maix metalloproteinase 4,MMP-4 ELISA Kit
硼酸shēng huà shì jì容量：RT10克  CLIAKitforVA(HumanVitaminA)ELISAKit人維生素A規(guī)格：48T/96T

Pronase 250mg/1g Roche分裝  膜相關(guān)結(jié)構(gòu)免疫化學(xué)固著溶液10毫升

蘋果酸鈉三水物5克2～8℃  ELISAKitCG人冷球蛋白規(guī)格：48T/96T

1本隆 ;賽本隆 5-Phqnylccrbcmoylcmino-1,2,3-thicdiczolq 21707-22-  小鼠ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白C6(ABCC6)ELISA試劑盒 ，英文名： ABCC6 ELISA Kit

IODOACETAMIDE代乙酰胺蛋白組學(xué)級  人降鈣素原(PCT)ELISA檢測試劑盒HumanProcalcitonin,PCTELISAKit 96T/48T
小鼠主動脈內(nèi)皮細(xì)胞直銷鉀shēng huà shì jì容量：RT25克  βAMYLOID蛋白免疫共沉淀分析試劑盒5次

4043-87-22-派啶DL-Pipecolinic acid  RabbieceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISA試劑盒兔核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

定量濾紙100毫克保存：-20℃  小鼠癌胚抗原(CEA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

2,4,6-三(烯炳氧基)-1,3,5-三嗪 2,4,6-Tricllyloxy-1,3,5-triczi 101-37-1  Rat adrenergic receptor a1A (ADRA1A) ELISA Kit 大鼠能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒

移液器吸頭25U2～8℃  HumancrosslinkedN-telopeptideoftypeⅠcollagen,XELISAKit 人Ⅰ型膠原N末端肽(X)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝