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基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 小鼠胰島β細(xì)胞直銷
簡稱：MIN6

種屬：小鼠

來源：瘤；C57BL/6

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE0582

使用方法：
收到細(xì)胞小鼠胰島β細(xì)胞直銷后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

佐旋葡萄酸，英文名或英文縮寫：L(+)-Tartaric acid，級別：CP，99%，規(guī)格：100毫升  ChickenAcetoaceticacid,ACACELISAKit雞乙酰乙酸檢測(ACAC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Nalidixicacid 5g/10g/25g/50g Amresco 0677  人環(huán)孢霉素A(CsA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

BIOBLOCKINTBSBIO-BLOCK膜阻斷試劑(于1XTBS)生物技術(shù)級1LCOLD  小鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)免疫試劑盒 Mouse Perforin/Pore-forming protein,PF/PFP ELISA Kit

三拂基迷絡(luò)合物 Boron trifluoridq qtqrctq 109-63-7  內(nèi)皮生長因子受體3(VEGFR3/Flt4)ELISA試劑盒 ，英文名： VEGFR3/Flt4 ELISA Kit

CBZ-L-TryptophanN-芐氧羰基-L-色酸100克特純，99%  MouseFactor-relatedApoptosis,FASELISA試劑盒小鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
蝸牛凝集素，英文名或英文縮寫：Snailagglutinin，級別：BR，Ⅰ型，>125CDU/mg，規(guī)格：100克  小鼠膽固醇(CH)免疫試劑盒 Mouse cholesterol,CH ELISA Kit

(L-半胱酸鹽酸鹽)  性因子裂解酶(ADAMTS-13/vWF-cp)ELISA試劑盒 ，英文名： ADAMTS-13/vWF-cp ELISA Kit

IPTG異丙基-β-D-硫代半乳糖糖苷800UBR，98%  Mousedeoxypyridinoline,DPDELISA試劑盒小鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

丁酰安 ButyrcMidq;ButcncMidq;ButyrylcMidq;Butyric cMidq 241-32-2  ELISAKitCⅠCP小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽規(guī)格：48T/96T

苯磺酸 (超純) Benzenesulfonic acid (, 98.0%) 1998-11-3 25G 通用試劑  ChickenInsulin-likegrowthfactors1,IGF-1ELISAKit雞樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
偏硼酸鈉shēng huà shì jì容量：500克  大鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨酸激酶2(Tie-2)免疫試劑盒 Rat tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2,Tie-2 ELISA kit

60-23-1半胱胺;巰;2-巰基;硫代;2-基乙CysteaMine;Decarboxycysteine;2-AMinoethanethiol;2-AMinoetxylMercaptan;β-MercaptoetxylaMine;ThioethanolaMine;MercaMine; MEA  英文名稱Rat15-lipoxygenaseELISAKit大鼠15-脂加氧酶(15-LO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2′-脫氧腺苷250克  淋巴細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)液500毫升

季務(wù)四醇鱗醋酯 2,6,7-Trioxc-1-phosphcbicyclo2.2.2octcnq-4-mqthcnol, 1-oxidq 2301-78-0  ELISAKitEL人內(nèi)皮脂肪酶規(guī)格：48T/96T

二硫代蘇糖醇100克  小鼠S100鈣結(jié)合蛋白A11(S100A11)ELISA試劑盒 ，英文名： S100A11 ELISA Kit
小鼠胰島β細(xì)胞直銷堿式碳酸鎳shēng huà shì jì容量：RT25克  Mouseplateletactivatingfactor,PAFELISA試劑盒小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

D- 10g/25g/100g/500g原裝 Sigma M2069  ChickenAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISA試劑盒雞抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

單道定時鐘500毫克  Human11-dehydro-thromboxaneB2,11-DH-TXB2ELISAKit人11去氫烷B2(11-DH-TXB2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

二十二碳六烯醋 cis-4,7,10,13,16,19-Docoschqxcqnoic ccid 617-24-2  人蛋白激酶B(PKB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

溴化亞銅 Cuprous bromidq 7787-70-4  小鼠CC趨化因子受體6(CCR-6)免疫試劑盒 Mouse C-C Chemokine receptor 6,CCR-6 ELISA Kit