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使用方法：
收到細胞小鼠微內(nèi)皮細胞特價后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 小鼠微內(nèi)皮細胞特價
簡稱：MCMEC

種屬：小鼠

來源：微；內(nèi)皮細胞

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE01341

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

Xanthorin  中文名：  分子式：C16H12O6    人瘦素 (Leptin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  

Xanthopurpurin  中文名：1,3-二羥基蒽醌  分子式：C14H8O4    余快速測試盒   Rapid test kit of residual

Xanthinol nicotinate  中文名：煙酸占替諾  分子式：C19H26N6O6    二氧化快速測試盒    dioxide rapid test case

Withaphysalin S  中文名：  分子式：C29H40O8    水硬度快速測試盒   Water hardness rapid test case

Withaphysalin E  中文名：  分子式：C28H34O7    硬度測定試劑盒   Hardness test kit
組織PKCδ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次  (R)-(+)-2-Amino-3-methyl-1,1-diphenyl-1-butanol  中文名：(R)-(+)-2-氨基-3-甲基-1,1-二苯基-1-丁醇  分子式：C17H21NO  度：98.0%

組織PKCγ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次  (R)-4-Methoxydalbergione  4646-86-0  中文名：(R)-4-甲氧基黃檀醌  分子式：C16H14O3  度：98.0%  關鍵詞：  抗菌; ; 巴西黑黃檀; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

組織PKCβ2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次  (R,E)-Deca-2-ene-4,6-diyne-1,8-diol  中文名：  分子式：C10H12O2  度：%

組織PKCβ1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次  (S)-(+)-4-Benzyl-3-propionyl-2-oxazolidinone  101711-78-8  中文名：(S)-(+)-4-芐基-3-丙酰-2-惡唑烷酮  分子式：C13H15NO3  度：98.0%   

組織PKCα激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次  (S)-4-(4-Aminobenzyl)-2(1H)-oxazolidinone  中文名：(s)-4-(4-氨基芐基)-1,3-噁唑烷-2-酮  分子式：C10H12N2O2  度：98.0%
7-Acetoxy-4-methylcoumarin  中文名：7-乙酰氧基-4-甲基香豆素  分子式：C12H10O4  度：95.0%  小鼠α羥基脫氫酶(αHBDH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Adrenosterone  中文名：腎上腺甾酮  分子式：C19H24O3  度：99.0%  小鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

(1S,2R)-2-Amino-1,2-diphenylethanol  中文名：(1S,2R)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇  分子式：C14H15NO  度：98.0%  小鼠α谷胱甘肽S轉移酶(α-GST)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

2-Acetylbutyrolactone  中文名：2-乙?；?nèi)酯  分子式：C6H8O3  度：98.0%  小鼠α甘露糖苷酶(αManase)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

2-Amino-9H-fluoren-9-one  中文名：2-氨基-9H-芴-9-酮  分子式：C13H9NO  度：99.0%  小鼠α半乳糖基抗原elisa試劑盒   小鼠α半乳糖基抗原試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠α半乳糖基抗原試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠α半乳糖基抗原試劑盒、小鼠α半乳糖基抗原eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。
小鼠微內(nèi)皮細胞特價豚鼠主要組織相容性復合體(MHC/GPLA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Amlodipine besylate  中文名：苯磺酸氨氯地平  分子式：C26H31ClN2O8S  度：99.0%

豚鼠主要組織相容性復合體(MHC/GPLA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Amlodipine besylate  111470-99-6  中文名：苯磺酸氨氯地平  分子式：C26H31ClN2O8S  度：99.0%  關鍵詞： 

豚鼠粘多糖   英文名稱：   Mucopolysaccharide   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   MLC  Allyl cinnamate  中文名：肉桂酸烯丙酯  分子式：C12H12O2 

豚鼠血清(NO)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Amlodipine  88150-42-9  中文名：氨氯地平  分子式：C20H25ClN2O5  度：98.0%  關鍵詞： 

豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物elisa試劑盒   豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物試劑盒、豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。     Amisulpride  中文名：阿米舒必利  分子式：C17H27N3O4S

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。