產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | AE0495 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來(lái)源 | 小腸;上皮細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
器官來(lái)源 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
免疫類(lèi)型 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
品系 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
生長(zhǎng)狀態(tài) | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
物種來(lái)源 | 小鼠 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來(lái)源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng): 小鼠小腸上皮細(xì)胞系特價(jià)
簡(jiǎn)稱(chēng):MODBKK
種屬:小鼠
來(lái)源:小腸;上皮細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號(hào):AE0495
使用方法:
收到細(xì)胞小鼠小腸上皮細(xì)胞系特價(jià)后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無(wú)菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開(kāi), 內(nèi)膜面向上,無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
Valsartan methyl ester 137863-17-3 中文名: 分子式:C25H31N5O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠凝血因子X 英文名稱(chēng): blood coagulation factor X 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): FX
Valsartan 137862-53-4 中文名:纈沙坦 分子式:C24H29N5O3 度:99.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠凝血因子XIII B 英文名稱(chēng): Mouse Coagulation Factor XIII B Polypeptide 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): F13B
Valnemulin 133868-46-9 中文名:鹽酸沃尼妙林 分子式:C31H53ClN2O5S 度:98.0% 小鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Valdecoxib 181695-72-7 中文名:帕瑞考昔 分子式:C16H14N2O3S 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠網(wǎng)膜素(omein)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Uzarigenin digitaloside 61217-80-9 中文名: 分子式:C30H46O8 度:97.5% 關(guān)鍵詞: 夾竹桃; 強(qiáng)心苷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠硝基酪酸(mouse Niotyrosine) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Diclazuril 中文名:地克珠利 分子式:C17H9Cl3N4O2
小鼠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Guaiacol glycidyl ether 2210-74-4 中文名: 分子式:C10H12O3
小鼠腺病毒(ADV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Mequindox 中文名:乙酰甲喹 分子式:C11H10N2O3
小鼠?;碳さ鞍?/span> 英文名稱(chēng): Mouse Acylation Stimulating Protein 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): ASP Otophylloside O 1326583-08-7 中文名: 分子式:C56H84O20
小鼠纖維連結(jié)蛋白(mous FN) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Menthyl-5-(4-amino-2-oxo-2H-pyrimidin-1-yl)-[1,3]oxathiolane-2-carboxylic acid 中文名: 分子式:C18H27N3O4S 度:98.0%
Androstenediol-3-acetate 1639-43-6 中文名:雄甾烯二醇-3-乙酸酯 分子式:C21H32O3 人鐵蛋白(FE)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human FE (Ferritin) ELISA Kit
Methenolone enanthate 303-42-4 中文名:美替諾龍庚酸酯 分子式:C27H42O3 人組織因子(TF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Methenolone acetate 434-05-9 中文名:美替諾龍醋酸酯 分子式:C22H32O3 人組織型纖維溶酶激活物(t-PA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Androst-2-en-17-one 963-75-7 中文名:5α-雄甾-2-烯-17-酮 分子式:C19H28O 人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Epiandrosterone 481-29-8 中文名:表雄酮 分子式:C19H30O2 人組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(lèi)相關(guān)基因D(MICD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠小腸上皮細(xì)胞系特價(jià)綠膿桿菌(PA)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>) 48T 3-Quinuclidinone 3731-38-2 中文名:3-奎寧環(huán)酮 分子式:C7H11NO
綠膿桿菌(PA)核酸檢測(cè)試劑盒 48T 3-Oxo-4-aza-5-alpha-androstane-17β-carboxylic acid 中文名: 分子式:C19H29NO3 度:98.0%
鹿樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISAKit ELISA. 96T/48T 3-Benzalphthalide 575-61-1 中文名:3-亞芐基苯酞 分子式:C15H10O2
鹿血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISAKit ELISA. 96T/48T 3-Aminopiperidine di 中文名: 分子式:C5H14Cl2N2
鹿內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISAKit ELISA. 96T/48T 3-Aminopiperidine di 中文名: 分子式:C5H14Cl2N2 度:98.0%