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公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 小鼠高轉(zhuǎn)移性細胞直銷
簡稱：4T1.2

種屬：小鼠

來源：；雌性；BALB/cfC3H

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE01428
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細胞小鼠高轉(zhuǎn)移性細胞直銷后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
Ranolazine di  中文名：鹽酸雷諾嗪  分子式：C24H35Cl2N3O4    吩嗪甲酯   1g

Ranolazine  中文名：雷諾嗪  分子式：C24H33N3O4    PhenMethosulfate   5g              

Ranitidine   中文名：鹽酸雷尼替丁  分子式：C13H23ClN4O3S    植物吲哚乙酸(IAA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Ranitidine  中文名：雷尼替丁  分子式：C13H22N4O3S    植物（ETH）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Raltegravir  中文名：雷特格韋  分子式：C20H21FN6O5    植物血凝素/凝集素（PHA）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
豬胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Sarafloxacin   中文名：鹽酸沙拉沙星  分子式：C20H18ClF2N3O3 

豬胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Sarmentocymarin  中文名：  分子式：C30H46O8  度：98.0%

豬胰島素樣生長因子2   英文名稱：   Porcine Insulin like Growth Factor 2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IGF-2  Stauntosaponin A  1417887-91-2  中文名：  分子式：C28H38O7 

豬胰島素樣生長因子1elisa試劑盒   豬胰島素樣生長因子1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬胰島素樣生長因子1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豬胰島素樣生長因子1試劑盒、豬胰島素樣生長因子1eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Sarsasapogenin  中文名：菝葜皂苷元  分子式：C27H44O3  度：99.0%

豬胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Sarafloxacin   91296-87-6  中文名：鹽酸沙拉沙星  分子式：C20H18ClF2N3O3  度：98.0%
5-Formyl-2-furylboronic acid  中文名：  分子式：C5H5BO4  度：98.0%  激酶（PK）測試盒   可見分光光度法   50管/48樣           

1-Methyl-aminomethyl naphthalene  中文名：  分子式：C12H13N  度：98.0%  線粒體呼吸鏈復合物II試劑盒（琥珀酸-輔酶Q還原酶）

Terbinafine  中文名：特比萘芬  分子式：C21H25N  度：98.0%  蛋白質(zhì)羰基含量測定試劑盒（測血清、組織）（紫外比色法）

N-[3-Chloro-4-(3-fluorobenzyloxy)phenyl]-6-iodoquinazolin-4-amine  中文名：  分子式：C21H14ClFIN3O  度：98.0%  超微量Ca-ATP酶測定試劑盒

3-Chloro-4-(3-fluorobenzyloxy)nitrobenzene  中文名：  分子式：C13H9ClFNO3  度：98.0%  超微量Ca2+Mg2+-ATP酶測定試劑盒（比色法）
小鼠高轉(zhuǎn)移性細胞直銷兔子細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Acetophenone tosylhydrazone  4545-21-5  中文名：苯乙酮對甲苯磺?；?/span>  分子式：C15H16N2O2S 

兔子細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1-Benzyl-5-ethoxyhydantoin  中文名：1-芐基-5-乙氧基海因  分子式：C12H14N2O3  度：98.0%

兔子細胞間粘附分子2elisa試劑盒   兔子細胞間粘附分子2試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子細胞間粘附分子2試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子細胞間粘附分子2試劑盒、兔子細胞間粘附分子2eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Abscisic acid  14375-45-2  中文名：脫落酸  分子式：C15H20O4  度：99.0%  關(guān)鍵詞： 

兔子細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Abscisic acid  中文名：脫落酸  分子式：C15H20O4  度：99.0%

兔子細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  9,9-Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl]fluorene  117344-32-8  中文名：9,9-雙[4-(2-羥乙氧基)苯基]芴  分子式：C29H26O4
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。