產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BK-P64465 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 2μg |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
質(zhì)粒pEGFP-N1 |
2μg |
BK-P64465 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
伊紅染液 Gram stain 4,6-Dichloro-2-(propylthio)pyrimidin-5-amine 中文名: 分子式:C7H9Cl2N3S 度:98.0%
伊紅Y 25g Prednisone 21-acetate 125-10-0 中文名:醋酸潑尼松 分子式:C23H28O6 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
氧化型谷胱甘肽elisa試劑盒 氧化型谷胱甘肽試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 氧化型谷胱甘肽試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:氧化型谷胱甘肽試劑盒、氧化型谷胱甘肽Eeisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 α-Spinasterol 481-18-5 中文名:α-菠甾醇 分子式:C29H48O
氧化酶(XOD)測(cè)試盒(比色法) Pitavastatin calcium 中文名:匹伐他汀鈣 分子式:C50H46CaF2N2O8 度:98.0%
氧化酶(XOD)測(cè)試盒 紫外分光光度法 50管/48樣 Pirfenidone 中文名:哌非尼酮 分子式:C12H11NO 度:98.0%
腦微內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)檸檬酸三鉀一水Potassium tribasic, monohydrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
Raji細(xì)胞,Butt`s瘤細(xì)胞 C57小鼠色素瘤瘤株,ME細(xì)胞 腎近曲小管上皮細(xì)胞裂解物HRPTEpiCLL-焦谷氨酸;氧脯氨酸H-Pyr-OH質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
NCI-H23(非小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2CBZ-L-焦谷氨酸Z-Pyr-OH質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
CCD-1095Sk(浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0078EL4(小鼠瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 615小鼠網(wǎng)織細(xì)胞性瘤株;L615DL-m-酪氨酸DL-m-Tyrosine質(zhì)量規(guī)格:0.98
犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)肌氨酸甲酯鹽酸鹽H-Sar-OMe·HCl質(zhì)量規(guī)格:BR,98%
腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL石蠟油Paraffin
oil, light fraction質(zhì)量規(guī)格:分子生物學(xué)級(jí),PCR Grade
APP-PS1細(xì)胞,APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株(HEK293) 宋內(nèi)氏志賀氏菌(Sh.sonnei) 山羊腎上皮樣細(xì)胞;DG-K1乙酸鉀Potassium acetate質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級(jí)
CXCL10 Protein Human 重組 CXCL10 / Crg-2 蛋白無水乙酸鈉 acetate, anhydrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級(jí)
OS-RC-2(細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 FSH alpha / TSH alpha / CGA 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 低熔點(diǎn)瓊脂糖;具有低凝膠溫度的瓊脂糖Agarose, low gelling temperature質(zhì)量規(guī)格:BR;具有低凝膠溫度
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;BALB/C 3T3無水1酸二氫鉀Potassium phosphate, monobasic,
anhydrous質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級(jí)
Artesunate
中文名:青蒿琥酯 分子式:C19H28O8 谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)測(cè)定試劑盒(比色法)
Aripiprazole 中文名:阿立哌唑 分子式:C23H27Cl2N3O2 總谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(T-GSH/GSSG)含量測(cè)定試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
Arillatose B 中文名: 分子式:C22H30O14 谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)試劑盒 DTNB法 50管/48樣
Arctinol B 中文名: 分子式:C13H12O2S2 谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)試劑盒 GR法 50管/48樣
Arbidol 中文名:鹽酸阿比朵爾 分子式:C22H26BrClN2O3S 硫氧還蛋白過氧化物酶(TPX)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣
質(zhì)粒pEGFP-N1本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。