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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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質(zhì)粒pEGFP-N1
起訂量 (盒)價(jià)格
1-104899 /盒
≥102899 /盒
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):BK-P64465
  • 發(fā)布日期: 2020-10-28
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 帛科
貨號(hào) BK-P64465
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 2μg
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1
RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

質(zhì)粒pEGFP-N1

2μg

BK-P64465

實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%
③RNA
沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2.
標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)時(shí)熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNARNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

伊紅染液   Gram stain  4,6-Dichloro-2-(propylthio)pyrimidin-5-amine  中文名:  分子式:C7H9Cl2N3S  度:98.0%

伊紅Y   25g  Prednisone 21-acetate  125-10-0  中文名:醋酸潑尼松  分子式:C23H28O6  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

氧化型谷胱甘肽elisa試劑盒   氧化型谷胱甘肽試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   氧化型谷胱甘肽試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:氧化型谷胱甘肽試劑盒、氧化型谷胱甘肽Eeisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。     α-Spinasterol  481-18-5  中文名:α-菠甾醇  分子式:C29H48O 

氧化酶(XOD)測(cè)試盒(比色法)  Pitavastatin calcium  中文名:匹伐他汀鈣  分子式:C50H46CaF2N2O8  度:98.0%

氧化酶(XOD)測(cè)試盒   紫外分光光度法   50/48  Pirfenidone  中文名:哌非尼酮  分子式:C12H11NO  度:98.0%
腦微內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)檸檬酸三鉀一水Potassium  tribasic, monohydrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

Raji細(xì)胞,Butt`s瘤細(xì)胞 C57小鼠色素瘤瘤株,ME細(xì)胞 腎近曲小管上皮細(xì)胞裂解物HRPTEpiCLL-焦谷氨酸;氧脯氨酸H-Pyr-OH質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

NCI-H23(非小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2CBZ-L-焦谷氨酸Z-Pyr-OH質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

CCD-1095Sk(浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0078EL4(小鼠瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 615小鼠網(wǎng)織細(xì)胞性瘤株;L615DL-m-酪氨酸DL-m-Tyrosine質(zhì)量規(guī)格:0.98

犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)肌氨酸甲酯鹽酸鹽H-Sar-OMe·HCl質(zhì)量規(guī)格:BR,98%
腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL石蠟油Paraffin oil, light fraction質(zhì)量規(guī)格:分子生物學(xué)級(jí),PCR Grade

APP-PS1細(xì)胞,APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株(HEK293) 宋內(nèi)氏志賀氏菌(Sh.sonnei) 山羊腎上皮樣細(xì)胞;DG-K1乙酸鉀Potassium acetate質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級(jí)

CXCL10 Protein Human 重組 CXCL10 / Crg-2 蛋白無水乙酸鈉 acetate, anhydrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級(jí)

OS-RC-2(細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2  FSH alpha / TSH alpha / CGA 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 低熔點(diǎn)瓊脂糖;具有低凝膠溫度的瓊脂糖Agarose, low gelling temperature質(zhì)量規(guī)格:BR;具有低凝膠溫度

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;BALB/C 3T3無水1酸二氫鉀Potassium phosphate, monobasic, anhydrous質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級(jí)
Artesunate  中文名:青蒿琥酯  分子式:C19H28O8    谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)測(cè)定試劑盒(比色法)                 

Aripiprazole  中文名:阿立哌唑  分子式:C23H27Cl2N3O2    總谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(T-GSH/GSSG)含量測(cè)定試劑盒   可見分光光度法   50/48

Arillatose B  中文名:  分子式:C22H30O14    谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)試劑盒   DTNB   50/48

Arctinol B  中文名:  分子式:C13H12O2S2    谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)試劑盒   GR   50/48

Arbidol   中文名:鹽酸阿比朵爾  分子式:C22H26BrClN2O3S    硫氧還蛋白過氧化物酶(TPX)試劑盒   紫外分光光度法   50/48

質(zhì)粒pEGFP-N1本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

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