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使用方法：
收到細(xì)胞人正常胃黏膜上皮細(xì)胞特價(jià)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人正常胃黏膜上皮細(xì)胞特價(jià)
簡稱：NGEC

種屬：人

來源：胃黏膜；上皮細(xì)胞

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE01417

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

Hydroxyprogesterone  中文名：羥孕酮  分子式：C21H30O3    豬壞死因子α(TNF-α)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Hydrocortisone  中文名：氫化可的松  分子式：C21H30O5    豬脂聯(lián)素(ADP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Horminone  中文名：7α-羥基羅列酮  分子式：C20H28O4    豬載脂蛋白B100(apo-B100)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Herbarin  中文名：  分子式：C16H16O6    豬載脂蛋白A1(apo-A1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Herbaridine B  中文名：  分子式：C17H20O6    豬壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
豬白細(xì)胞間介素 1   英文名稱：   Porcine Ierleukin 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IL-1  Tenacigenin B  80508-42-5  中文名：  分子式：C21H32O5  度：%  關(guān)鍵詞：  通光散; 孕甾烷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

豬白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Telmisartan tert-butyl ester  中文名：  分子式：C37H38N4O2 

豬白介素8(IL-8/CXCL8)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Tenacigenoside A  中文名：  分子式：C35H56O12  度：%

豬白介素6elisa試劑盒   豬白介素6試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬白介素6試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬白介素6試劑盒、豬白介素6 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     Lonidamine  50264-69-2  中文名：氯尼達(dá)明  分子式：C15H10Cl2N2O2 

豬白介素6(IL-6)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Telmisartan tert-butyl ester  144702-26-1  中文名：  分子式：C37H38N4O2  度：98.0%
Perospirone   中文名：鹽酸哌羅匹隆  分子式：C23H31ClN4O2S  度：98.0%  兔血清總補(bǔ)體(CH50)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

   中文名：枸櫞酸  分子式：C28H38N6O11S  度：98.0%  兔乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Amlexanox  中文名：氨來呫諾  分子式：C16H14N2O4  度：98.0%  兔誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Losartan  中文名：氯沙坦  分子式：C22H23ClN6O  度：98.0%  兔子孕激素elisa試劑盒   兔子孕激素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子孕激素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子孕激素試劑盒、兔子孕激素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Glyburide  中文名：格列本脲  分子式：C23H28ClN3O5S  度：98.0%  兔子樣生長因子1elisa試劑盒   兔子樣生長因子1試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子樣生長因子1試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子樣生長因子1試劑盒、兔子樣生長因子1eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。
人正常胃黏膜上皮細(xì)胞特價(jià)兔子S100B蛋白(S-100B)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  6-Aminoindole  5318-27-4  中文名：6-氨基吲哚  分子式：C8H8N2  度：98.0%   

兔子E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  6-Aminoindazole  6967-12-0  中文名：6-氨基吲唑  分子式：C7H7N3  度：98.0%   

兔子D二聚體(D2D)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  6-Amino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic acid  90-51-7  中文名：6-氨基-4-羥基-2-萘磺酸  分子式：C10H9NO4S  度：98.0%   

兔子C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  6-Amino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic acid  90-51-7  中文名：6-氨基-4-羥基-2-萘磺酸  分子式：C10H9NO4S 

兔子C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  9,9-Bis(4-amino-3-methylphenyl)fluorene  107934-60-1  中文名：9,9-雙(4-氨基-3-甲苯基)芴  分子式：C27H24N2

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。