產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BK-P64429 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 100mL |
純度 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
組織保存液 |
100mL |
BK-P64429 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白elisa試劑盒 小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白試劑盒、小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Linagliptin 中文名:利拉利汀 分子式:C25H28N8O2
小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 N-Boc-O-Benzyl-D-serine 中文名:N-Boc-O-芐基-D-絲氨酸 分子式:C15H21NO5
小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶elisa試劑盒 小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶試劑盒、小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 N-Benzylmaleimide 中文名:N-芐基馬來(lái) 分子式:C11H9NO2 度:98.0%
小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 N-Boc-O-Benzyl-D-serine 47173-80-8 中文名:N-Boc-O-芐基-D-絲氨酸 分子式:C15H21NO5 度:98.0%
小鼠致癌基因相關(guān)蛋白elisa試劑盒 小鼠致癌基因相關(guān)蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠致癌基因相關(guān)蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠致癌基因相關(guān)蛋白試劑盒、小鼠致癌基因相關(guān)蛋白elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 N-Benzylmaleimide 中文名:N-芐基馬來(lái) 分子式:C11H9NO2
雜交瘤(B類);Z172A4C4C6F3G12 Butt's 瘤細(xì)胞,Raji細(xì)胞 HBZY-1細(xì)胞,大鼠腎小球系膜細(xì)胞EC(HBZY-1)維生素B6,鹽酸吡哆醇Vitamin B6 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
UM-UC-3, 膀胱移行細(xì)胞癌 Human維生素B6(標(biāo)準(zhǔn)品)vitamin B6質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品
LILRB3 Others Human LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (+)-5-反式氯前列醇(+)-5-trans Cloprostenol質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
動(dòng)物星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基AM-a(+/-)-氯前列醇鈉鹽水合物(+/-)-Cloprostenol salt hydrate質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
IFNA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (+)-氯前列醇(+)-Cloprostenol質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性細(xì)胞;RBL-2H3 細(xì)胞,BEL-7404細(xì)胞 CEL細(xì)胞,雞胚原代肝細(xì)胞玫紅酸(AR)Rosolic acid質(zhì)量規(guī)格:AR
RBE, 肝細(xì)胞 Human玫紅酸(指示劑級(jí))Rosolic acid質(zhì)量規(guī)格:指示劑級(jí)
CST2 Others Human CST2 / Cystatin-2 / Cystatin-SA 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 草酸鈉容量分析用溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) oxalate solution for volumetric analysis質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.96%
羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞HAMSC百里香酚藍(lán)(IND)Thymolblue質(zhì)量規(guī)格:IND
FGFR3 Others Cynomolgus 食蟹猴 FGFR3 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 百里香酚藍(lán)(ACS reagent,95 %)Thymolblue質(zhì)量規(guī)格:ACS
reagent,95 %
4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene 中文名:4,4'-雙(5-甲基-2-苯并惡唑基)芪 分子式:C30H22N2O2 病毒Asia-1亞型(FMDV-A1)*試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
4,4'-Bis(2-benzoxazolyl)stilbene 中文名:4,4'-雙(2-苯并惡唑基)芪 分子式:C28H18N2O2 鴨特定基因序列(Duck)*試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
4-(Phenylthio)benzyl alcohol 中文名: 分子式:C13H12OS 鴨特定基因序列(Duck)*試劑盒 48T
4-(N-Methyl)-aminoantipyrine 中文名: 分子式:C12H15N3O 鵝特定基因序列(Goose)*試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
4-(4-Fluorophenyl)-6-isopropyl-2-[(N-methyl-N-methylsulfonyl)amino]pyrimidinyl-5-yl-formyl 中文名: 分子式:C16H18FN3O3S 鵝特定基因序列(Goose)*試劑盒 48T
組織保存液本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。