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| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BK-P64564 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
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產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
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弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒 |
50次 |
BK-P64564 |
實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
豬球蛋白Gelisa試劑盒 豬球蛋白G試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 豬球蛋白G試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豬球蛋白G試劑盒、豬球蛋白Geisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。 Stavudine 中文名：司他夫定 分子式：C10H12N2O4 度：98.0%
豬球蛋白G(IgG)ELISAKit ELISA. 96T/48T Stellasterol 中文名：星魚甾醇 分子式：C28H46O 度：96.0%
豬球蛋白Eelisa試劑盒 豬球蛋白E試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 豬球蛋白E試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豬球蛋白E試劑盒、豬球蛋白Eeisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。 Stavudine 中文名：司他夫定 分子式：C10H12N2O4
豬球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Stigmast-4-ene-3β,6β-diol 113626-76-9 中文名：豆甾-4-烯-3β,6β-二醇 分子式：C29H50O2 度：93.0% 關(guān)鍵詞： 豆甾烷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
豬球蛋白E(IgE)ELISAKit ELISA.
96T/48T Stellasterol 中文名：星魚甾醇 分子式：C28H46O
CSH1 Others Human CSH1 / Lactogen 細胞裂解液 (陽性對照) 唑來1酸質(zhì)量規(guī)格：>99%,一水化合物,BRZoledronic acid hydrate
MSC, 小鼠雪旺細胞唑來1酸（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Zoledronic acid hydrate
ABHD4 Others Human ABHD4 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 檸檬酸鉍質(zhì)量規(guī)格：BRBismuth (III)
肺間充質(zhì)干細胞RNAHPMSC miRNA5 μg化鉍鉀質(zhì)量規(guī)格：BRBismuth (III) potassium iodide
A673細胞，橫紋肌瘤細胞 非小細胞細胞,NCI-H838細胞 CL-0460U14-GFP(小鼠子細胞)5×106cells/瓶×2硫酸鉍(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBismuth (III) sulfate
絨毛間葉成纖維細胞(HVT)( 5×105 )
MCF-7(MCF7)(ATCC來源), 癌細胞 Human環(huán)孢菌素,環(huán)孢素A,環(huán)孢霉素A（標準品）Cyclosporine A質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品
皮膚色素瘤細胞;SK-MEL-1鹽酸噻氯匹定Ticlopidine HCl質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
EPD3 Others Human EPD3 / PDase3 / CD39L3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸噻氯匹定（標準品）Ticlopidine HCl質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品
CM-H118腦平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL阿糖胞苷(進分)Cytarabine質(zhì)量規(guī)格：進分,Sigma C1768
T24, 細胞 胚癌細胞,Pcc4細胞 NCI-H1299(細胞)阿糖胞苷Cytarabine質(zhì)量規(guī)格：>99.0%,細胞培養(yǎng)級
N4-Benzoyl-2'-deoxycytidine 中文名：N4-苯甲?；?span>-2'-脫氧胞苷 分子式：C16H17N3O5 雙氫睪(DHT)ELISAKit ELISA.
96T/48T
N1-Methyl-4-nitrobenzene-1,2-diamine 中文名： 分子式：C7H9N3O2 豬C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
N-[Bis(methylthio)methylene]- p-sulfonamide 中文名：N-[雙(甲硫基)亞甲基]對甲苯磺酰胺 分子式：C10H13NO2S3 豬B細胞瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
N-[3-Chloro-4-(3-fluorobenzyloxy)phenyl]-6-iodoquinazolin-4-amine 中文名： 分子式：C21H14ClFIN3O 豬Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
N-[2-Isopropylthiazol-4-ylmethyl(methyl)carbamoyl]-L-valine 中文名： 分子式：C14H23N3O3S 豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative
real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
