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公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng)： 人細(xì)胞直銷(xiāo)
簡(jiǎn)稱(chēng)：BPH-1

種屬：人

來(lái)源：良性；男性

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE0197
基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞人細(xì)胞直銷(xiāo)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
Cholesterol  57-88-5  中文名：膽固醇  分子式：C27H46O  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠α半乳糖基抗原(α-Gal)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Chlorpheniramine maleate  113-92-8  中文名：馬來(lái)酸氯苯那敏  分子式：C20H23ClN2O4  度：98.0%      小鼠β基己糖苷酶A(β-HexA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Chlorotetracycline  57-62-5  中文名：金霉素  分子式：C22H23ClN2O8  度：98.0%      小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISAKit   ELISA.   96T/48T            

Chlorogenic acid  327-97-9  中文名：綠原酸  分子式：C16H18O9  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  *; 抗氧化; 莽草酸; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Chlorhexidine acetate  56-95-1  中文名：醋酸氯己定  分子式：C26H38Cl2N10O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
小鼠堿性成纖維生長(zhǎng)因子(mouse b-FGF/FGF-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Lafutidine  中文名：拉呋替丁  分子式：C22H29N3O4S 

小鼠堿性0酸酶elisa試劑盒   小鼠堿性0酸酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠堿性0酸酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠堿性0酸酶試劑盒、小鼠堿性0酸酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Ergosterol peroxide  2061-64-5  中文名：過(guò)氧化麥角甾醇  分子式：C28H44O3  度：96.0%  關(guān)鍵詞：  ; ; 抗結(jié)核分枝桿菌; 菠蘿; 寬葉香蒲; 麥角甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

小鼠堿性0酸酶(ALP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Dregeoside A11  中文名：  分子式：C55H88O22  度：%

小鼠堿性0酸酶(ALP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Dehydroadynerigenin β-neritrioside  143212-60-6  中文名：  分子式：C42H62O17 

小鼠堿性0酸酶   英文名稱(chēng)：   Mouse Alkaline phosphatase   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   ALP  D-Pinitol  中文名：D-松醇  分子式：C7H14O6  度：98.0%
Glycerol 1-(26-hydroxyhexacosanoate)  177602-14-1  中文名：  分子式：C29H58O5    HumanCaspase-9,Casp-9ELISAKit 人胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

2-C-Methyl-D-erythritol  58698-37-6  中文名：2-C-甲基-D-赤蘚糖醇  分子式：C5H12O4    HumanD-LactateDehydrogenase,D-LDHELISA試劑盒人D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2-(2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)propane-1,2-diol  129141-48-6  中文名：  分子式：C8H16O4    組織NADPH氧化酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒20次(10樣本)

Linderaspirone A  1235126-46-1  中文名：  分子式：C34H32O10    HumanPhosphoglucomase,PGMELISAKit人0酸葡萄糖變位酶(PGM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2-Hydroxytetracosanoic acid ethyl ester  124111-47-3  中文名：  分子式：C26H52O3    兔子皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人細(xì)胞直銷(xiāo)Tebipenem pivoxil  中文名：泰比培南酯  分子式：C22H31N3O6S2    醇脫氫酶（ADH）試劑盒   紫外分光光度法    50管/48樣

Tazobactam acid  中文名：他唑巴坦酸  分子式：C10H12N4O5S    脂氧合酶（LOX）試劑盒   紫外分光光度法    50管/48樣

Taxilluside A  中文名：  分子式：C18H24O10    ?；D(zhuǎn)移酶（AAT）試劑盒   可見(jiàn)分光光度法   10管/9樣           

Tauroursodeoxycholic acid  中文名：牛磺熊去氧膽酸  分子式：C26H45NO6S    脂肪酸合成酶   英文名稱(chēng)：   Human Fatty Acid Syhase   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   FASN

Taurocholic acid  中文名：?；悄懰?/span>  分子式：C26H45NO7S    脂肪酸合成酶   英文名稱(chēng)：   Human Fatty Acid Syhase   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   FASN
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。