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使用方法：
收到細(xì)胞人直銷后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人直銷
簡稱：U-138MG

種屬：人

來源：星形細(xì)胞瘤；男性

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE0569

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

Bendamustine   3543-75-7  中文名：鹽酸苯達(dá)莫司汀  分子式：C16H22Cl3N3O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Benazepril   86541-74-4  中文名：鹽酸貝那普利  分子式：C24H29ClN2O5  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠硫氧還蛋白還原酶(xR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Benactyzine   57-37-4  中文名：鹽酸貝那替嗪  分子式：C20H26ClNO3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠硫氧化還原蛋白(x)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Bathophenanthroline  1662-01-7  中文名：紅菲繞啉  分子式：C24H16N2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠抗體（EHF-Ab）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Baclofen  1134-47-0  中文名：巴氯芬  分子式：C10H12ClNO2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠0脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
小鼠活化素A(Activin-A)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Dimetridazole  551-92-8  中文名：二甲硝咪唑  分子式：C4H5N3O2  度：99.0%   

小鼠活化蛋白elisa試劑盒   小鼠活化蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠活化蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠活化蛋白試劑盒、小鼠活化蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。     Dinitolmide  148-01-6  中文名：二硝托胺  分子式：C8H7N3O5 

小鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Dimetridazole  551-92-8  中文名：二甲硝咪唑  分子式：C4H5N3O2 

小鼠活化蛋白C(APC)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Ethyl (1-hydroxy-4-oxocyclohexa-2,5-dien-1-yl)acetate  中文名：  分子式：C10H12O4 

小鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Tetraethyl ranelate  58194-26-6  中文名：  分子式：C20H26N2O8S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：
Desglucohellebrin  20300-44-1  中文名：  分子式：C30H42O10    Humanai-deoxyribonucleaseB,ai-DNaseBELISAKit 人抗DNA酶B抗體(ai-DNaseB)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Polypodine B  18069-14-2  中文名：水龍骨甾酮B  分子式：C27H44O8    humanEchoVirusIgM,ECHOIgMELISA試劑盒人艾柯病毒IgM(ECHOIgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

14β,16β-Dihydroxy-3β-(β-D-glucopyranosyloxy)-5α-bufa-20,22-dienolide  1323952-04-0  中文名：  分子式：C30H44O10    組織PDGFRα激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

Withanolide S  63139-16-2  中文名：醉茄內(nèi)酯S  分子式：C28H40O8    HumanPeptidylprolylcis/ansisomerase,PPIELISAKit人肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶(PPI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Ergosterol glucoside  130155-33-8  中文名：麥角甾醇葡萄糖苷  分子式：C34H54O6    兔子可溶性細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人直銷Stigmastane-3,6-diol  中文名：  分子式：C29H52O2    載脂蛋白   英文名稱：   Apolipoprotein   英文縮寫：   AI   規(guī)格：   48T/96T

Stigmasta-5,8-dien-3-ol  中文名：  分子式：C29H48O    抗Livin 抗體   英文名稱：   Ailivin aibody   英文縮寫：   ALA   規(guī)格：   48T/96T

Stigmasta-4,25-dien-3-one  中文名：  分子式：C29H46O    直鏈淀粉   250mg

Stigmasta-4,22-diene-3β,6β-diol  中文名：  分子式：C29H48O2    Amylose,fromPotato   1g

Stigmasta-4,22-dien-3-one  中文名：豆甾-4,22-二烯-3-酮  分子式：C29H46O    抗蛋白酶   250mg

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。