產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE038888 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 口腔異常增生;男性 |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人口腔黏膜癌前細(xì)胞直銷
簡稱:DOK
種屬:人
來源:口腔異常增生;男性
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE0388
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞人口腔黏膜癌前細(xì)胞直銷后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
Aminophenazone 中文名: 分子式:C13H17N3O 脂褐質(zhì)(不包括比色)檢測 Free fatty acids (NEFA) detection
Ambroxol 中文名:鹽酸氨溴索 分子式:C13H19Br2ClN2O 組織因子 英文名稱: tissue factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TF
Ambrisentan 中文名:安倍生坦 分子式:C22H22N2O4 組織因子抑制物 英文名稱: tissue factor protein inhibitor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TFPⅠ
Altrenogest 中文名:烯丙孕素 分子式:C21H26O2 轉(zhuǎn)移生長因子-α 英文名稱: Ttansforming Growth Factor α 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TGF-α
alpha-Terthienylmethanol 中文名: 分子式:C13H10OS3 轉(zhuǎn)移生長因子-β1 英文名稱: Ttansforming Growth Factor β1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TGF-β1
鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISAKit ELISA. 96T/48T Phyllostine 27270-89-9 中文名: 分子式:C7H6O4 度:98.5% 關(guān)鍵詞: 對照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
鴨毒elisa試劑盒 鴨毒試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 鴨毒試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:鴨毒試劑盒、鴨毒eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Periplogenin 中文名:杠柳苷元 分子式:C23H34O5 度:98.0%
鴨毒(DEV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Periplocoside O 中文名:北五加皮苷O 分子式:C36H56O10 度:98.0%
鴨毒(DEV)ELISAKit ELISA. 96T/48T Perospirone 129273-38-7 中文名:鹽酸哌羅匹隆 分子式:C23H31ClN4O2S 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
鴨白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Periplocoside O 中文名:北五加皮苷O 分子式:C36H56O10
Tauroursodeoxycholic acid 中文名:牛磺熊去氧膽酸 分子式:C26H45NO6S 度:96.0% 兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISAkit ELISA. 96T/48T
Lithocholic acid 中文名:石膽酸 分子式:C24H40O3 度:98.5% 兔心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Citrostadienol 中文名:檸檬二烯醇 分子式:C30H50O 度:93.0% 兔溶菌酶(LZM)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Cyasterone 中文名:杯莧甾酮 分子式:C29H44O8 度:99.0% 兔子催乳素(PRL)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Taurocholic acid 中文名:?;悄懰?/span> 分子式:C26H45NO7S 度:96.0% 兔熱休克蛋白70(HSP-70)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人口腔黏膜癌前細(xì)胞直銷水飽和酚 10x250ml 4-(4-(5-(Aminomethyl)-2-oxooxazolidin-3-yl)phenyl)morpholin-3-one 898543-06-1 中文名: 分子式:C14H18ClN3O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
雙重酯酶染液 Wright - Giemsa dye composite 4,4'-Cyclohexylidenebisphenol 中文名:4,4'-環(huán)亞己基雙苯酚 分子式:C18H20O2
雙向調(diào)節(jié)蛋白 英文名稱: Amphiregulin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: AR 4-(4-(5-(Aminomethyl)-2-oxooxazolidin-3-yl)phenyl)morpholin-3-one 446292-10-0 中文名: 分子式:C14H17N3O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
雙縮脲法蛋白含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 Prasugrel 150322-43-3 中文名:普拉格雷 分子式:C20H20FNO3S 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
雙縮脲法蛋白含量測試盒 可見分光光度法 100管/96樣 Prasugrel 150322-43-3 中文名:普拉格雷 分子式:C20H20FNO3S
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。