產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P64471 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
鵝源性成分PCR試劑盒 |
50次 |
BK-P64471 |
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
乙酰膽堿(ACH)測定試劑盒(測血清)(微板法) Trityl candesartan cilexetil 中文名: 分子式:C52H48N6O6
乙酰膽堿 英文名稱: Acetylcholine 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ACH Olanzapine 132539-06-1 中文名:奧氮平 分子式:C17H20N4S
乙酰胺 100g Pregnenolone 145-13-1 中文名:孕烯醇酮 分子式:C21H32O2 度:98.5% 關(guān)鍵詞: ; 白鮮; 孕甾烷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
乙酰L-肉堿鹽酸鹽 100g Prerubialatin 中文名: 分子式:C27H20O7 度:%
乙肟
500ml Pregnenolone 中文名:孕烯醇酮 分子式:C21H32O2 度:98.5%
新生牛眼晶體上皮細胞;NBLE苯駢三氮唑(BTA,1,2,3-苯駢三氮唑)1H-Benzotriazole質(zhì)量規(guī)格:AR,分析
NCI-H2087細胞,非小細胞 逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝的NIH3T3細胞,PA317細胞 CM-R095大鼠成年表皮角質(zhì)形成層細胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸倍他司汀Betahistine Di質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
RL95-2(內(nèi)膜癌細胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸倍他司汀(標準品)Betahistine Di質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
Gibco 10725018 Keratinocyte-SFM (1X), Liquid with L-Glutamine, without Calcium Chloride 500 ml甲磺酸倍他司汀Betahistine Dimesilate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
骨骼肌衛(wèi)星細胞RNAHSkMSC miRNA5 μg(豬)INSULIN質(zhì)量規(guī)格:BR,來源豬胰臟
成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL楊梅苷(標準品)Myricetrin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
PA317細胞,逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝用的胚胎成纖維細胞 小腸耶爾森氏菌 豚鼠肺細胞;GP-F1楊芽黃素(標準品)Tectochrysin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
CCL17 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CCL17 / TARC 蛋白 (His 標簽)洋川芎內(nèi)酯A(標準品)Senkyunolide A質(zhì)量規(guī)格:鑒別用,標準品
NG108-15(小鼠神經(jīng)細胞瘤與大鼠神經(jīng)之融合細胞) 5×106cells/瓶×2 FAM20B / Gxk1 細胞裂解液 (陽性對照) 氧化槐果堿(標準品)Oxysophocarpine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E7BelinostatBelinostat
(PXD101)質(zhì)量規(guī)格:>98%
Benzoin methyl ether 中文名:安息香甲基醚 分子式:C15H14O2 121℃/132℃壓力蒸汽滅菌指示卡 121 temperature /132 for
pressure steam sterilization indicator card
Benzoin 中文名:安息香 分子式:C14H12O2 PH廣范試紙 PH wide range test paper
Benzofuroxan 中文名:苯并呋咱 分子式:C6H4N2O2 PH精密試紙 PH precision test paper
Benzo-18-crown-6 ether 中文名:苯并-18-冠6-醚 分子式:C16H24O6 總RNA提取試劑盒(RNApure+仿) Total RNA Exaction Kit (RNApure+ )
Benzo-15-crown 5-ether 中文名:苯并-15-冠5-醚 分子式:C14H20O5 細菌/總RNA提取試劑盒 Bacterial / total RNA Exaction Kit
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative
real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
鵝源性成分PCR試劑盒主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR