產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | AE0879 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來(lái)源 | 角質(zhì)形成層 |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 |
器官來(lái)源 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 |
免疫類型 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 |
品系 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 |
生長(zhǎng)狀態(tài) | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 |
物種來(lái)源 | 人 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人角質(zhì)形成層細(xì)胞特價(jià)
簡(jiǎn)稱:COLO-1
種屬:人
來(lái)源:角質(zhì)形成層
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號(hào):AE0879
基本特性:
( 1 )組織來(lái)源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞人角質(zhì)形成層細(xì)胞特價(jià)后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無(wú)菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開(kāi), 內(nèi)膜面向上,無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
8-Hydroxyhyperforin 8,1-hemiacetal 59014-02-7 中文名: 分子式:C35H52O5 度:% 關(guān)鍵詞: 貫葉連翹; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISAKit ELISA. 96T/48T
8-Hydroxy-7-iodo-5-quinolinesulfonic acid 547-91-1 中文名:喹方 分子式:C9H6INO4S 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠活化蛋白C(APC)ELISAKit ELISA. 96T/48T
8-Bromo-7-(but-2-yn-1-yl)-3-methyl-1H-purine-2,6(3H,7H)-dione 666816-98-4 中文名: 分子式:C10H9BrN4O2 度:98.0% 小鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISAKit ELISA. 96T/48T
8-Azaguanine 134-58-7 中文名:8-氮雜鳥(niǎo)嘌呤 分子式:C4H4N6O 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠胰蛋白酶(ypsin)ELISAKit ELISA. 96T/48T
8-Amino-2-naphthalenesulfonic acid 119-28-8 中文名:8-氨基-2-萘磺酸 分子式:C10H9NO3S 度:98.0% 小鼠可溶性CD30配體(sCD30L)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠骨鈣素 英文名稱: Osteocalcin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: OC Dehydro-α-lapachone 中文名: 分子式:C15H12O3 度:97.5%
小鼠骨成型蛋白受體elisa試劑盒 小鼠骨成型蛋白受體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠骨成型蛋白受體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠骨成型蛋白受體試劑盒、小鼠骨成型蛋白受體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Cefquinome 中文名:頭孢喹咪 分子式:C23H24N6O5S2
小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(mouse BMP-R2) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Dehydrotolvaptan 中文名: 分子式:C26H23ClN2O3 度:98.0%
小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Deoxycholic acid 83-44-3 中文名:去氧膽酸 分子式:C24H40O4
小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISAKit ELISA. 96T/48T Dehydroherbarin 中文名: 分子式:C16H14O5 度:96.0%
11,12-Di-O-acetyltenacigenin B 857897-01-9 中文名: 分子式:C25H36O7 HumanparamyxovirusparotitisIgMELISAKit人病毒IgMELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Tenacissoside I 191729-44-9 中文名:通關(guān)藤苷I 分子式:C44H62O14 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Stigmasta-4,25-dien-3-one 848669-08-9 中文名: 分子式:C29H46O Human thymosin (Thymosin) ELISA Kit 人胸腺肽(Thymosin)ELISA試劑盒
Stigmasta-4,22,25-trien-3-one 848669-09-0 中文名: 分子式:C29H44O Humanai-nucleolusaibody,ANAELISAKit 人抗核仁抗體(ANA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
20-Hydroxyecdysone 5289-74-7 中文名:20-羥基蛻皮甾酮 分子式:C27H44O7 Humaneosinophilchemotacticfactor,ECFELISA試劑盒人鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人角質(zhì)形成層細(xì)胞特價(jià)Sibiricose A1 139726-40-2 中文名:6'-芥子酰基蔗糖 分子式:C23H32O15 度:97.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Shiraiachrome A 124709-39-3 中文名: 分子式:C30H26O10 度:% 關(guān)鍵詞: 抗生成; 對(duì)照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠血小板因子3(PF-3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Shikonin 517-89-5 中文名:紫草素 分子式:C16H16O5 度:99.0% 關(guān)鍵詞: 抗菌; 萘醌; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Shikimic acid 138-59-0 中文名:莽草酸 分子式:C7H10O5 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 莽草; 莽草酸; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Sertaconazole 99592-32-2 中文名:舍他康唑 分子式:C20H15Cl3N2OS 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體elisa試劑盒 小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體試劑盒、小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。