產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | AE01474 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 骨肉瘤;女性 |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱:HOS
種屬:人
來源:;女性
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號(hào):AE01474
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞人細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
5-Chlorothiophene-2-carboxylic acid 中文名: 分子式:C5H3ClO2S 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-4 英文名稱: insulin-like growth factors binding protein-4 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: IGFBP-4
5-Chloro-4-methoxy-2-oxo-1,2-dihydropyridine-3-carbonitrile 中文名: 分子式:C7H5ClN2O2 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白 -4(IGFBP-4) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
5-Chloro-2-nitrobenzoic acid 中文名: 分子式:C7H4ClNO4 球蛋白 IgA(IgA) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
5-Benzyloxyindole 中文名:5-芐氧基吲哚 分子式:C15H13NO 球蛋白 IgE(IgE) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
5-Benzyl-1H-tetrazole 中文名:5-芐基-1H-四唑 分子式:C8H8N4O 球蛋白 IgG(IgG) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
血0濃度測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 p-Anisil 中文名:茴香偶酰 分子式:C16H14O4
溴紫 5g Olopatadine 中文名:鹽酸奧洛他定 分子式:C21H24ClNO3 度:98.0%
溴化乙錠 1g Oleandrin 中文名: 分子式:C32H48O9 度:98.0%
溴酚蘭 10g Olopatadine 140462-76-6 中文名:鹽酸奧洛他定 分子式:C21H24ClNO3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
雄激素結(jié)合蛋白 英文名稱: Androgen Binding Protein 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ABP Olanzapine 中文名:奧氮平 分子式:C17H20N4S 度:98.0%
2-n-Propyl-4-methyl-6-(1-methylbenzimidazole-2-yl)benzimidazole 152628-02-9 中文名: 分子式:C19H20N4 兔骨形成蛋白(BMPs)ELISAKit ELISA. 96T/48T
2-Chloro-11-cyclopentyl-5H-benzo[e]pyrimido[5,4-b][1,4]diazepin-6(11H)-one 1521197-43-2 中文名: 分子式:C16H15ClN4O 兔骨保護(hù)素(OPG)ELISAKIT ELISA. 96T/48T
5'-Deoxy-5-fluorocytidine 66335-38-4 中文名: 分子式:C9H12FN3O4 兔胰淀素(Amylin)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Doxifluridine 3094/9/5 中文名: 分子式:C9H11FN2O5 兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Tofacitinib 540737-29-9 中文名:枸櫞酸托法替尼 分子式:C22H28N6O8 兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體elisa試劑盒 兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒、兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
人細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)乳酸脫氫酶elisa試劑盒 乳酸脫氫酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 乳酸脫氫酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:乳酸脫氫酶試劑盒、乳酸脫氫酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 3-Amino-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one 4149/6/8 中文名:3-氨基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮 分子式:C9H9N3O 度:98.0%
乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒(微板法) 3-Allylrhodanine 1457-47-2 中文名:3-烯丙基羅丹寧 分子式:C6H7NOS2 度:99.0% 關(guān)鍵詞:
乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒(微板法) Ranolazine 95635-55-5 中文名:雷諾嗪 分子式:C24H33N3O4
乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒(比色法) Ranolazine 95635-55-5 中文名:雷諾嗪 分子式:C24H33N3O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
乳酸脫氫酶(LDH)檢測 ATP enzyme ( and potassium, calcium and ATP enzyme) detection 3-Acetyl-2,5-dichlorothiophene 中文名: 分子式:C6H4Cl2OS 度:98.0%
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。