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使用方法：
收到細(xì)胞人宮頸上皮永生化細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng)： 人宮頸上皮永生化細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡(jiǎn)稱(chēng)：H8

種屬：人

來(lái)源：宮頸；上皮細(xì)胞；永生化

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE0492

基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

5-Azacytidine  中文名：5-氮胞苷  分子式：C8H12N4O5    堿性0酸酶（AKP）檢測(cè)   Acid phosphatase (ACP) detection

5-Androsten-3β-ol-17-one ethyleneketal  中文名：  分子式：C21H32O3    酸性0酸酶（ACP）檢測(cè)   Prostate acid  enzyme (PACP) detection

5-Aminouracil  中文名：5-氨基尿嘧啶  分子式：C4H5N3O2    酸性0酶（PACP）檢測(cè)   Glamine syhetase (GS) detection              

5-Aminosalicylic acid  中文名：5-氨基水楊酸  分子式：C7H7NO3    胰蛋白酶1:250   250g

5-Aminoindole  中文名：5-氨基吲哚  分子式：C8H8N2    ypsin1:250,PorcinePancreas   25g
胸苷酸合成酶   英文名稱(chēng)：   thymidylate syhase   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   TS  Pazufloxacin mesilate  163680-77-1  中文名：甲磺酸帕珠沙星  分子式：C17H19FN2O7S  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

性激素結(jié)合球蛋白   英文名稱(chēng)：   Sex Hormone Binding Globulin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   SHBG  O-Benzyl-L-serine  中文名：O-芐基-L-絲氨酸  分子式：C10H13NO3  度：98.0%

型脂肪酸結(jié)合蛋白   英文名稱(chēng)：   Human hea Fatty Acid Binding Protein   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   hFABP  n-Tritriacontan-16,18-dione  中文名：  分子式：C33H64O2  度：%

鏈球菌(ST)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>)   48T  Norfloxacin lactate  中文名：乳酸諾氟沙星  分子式：C19H24FN3O6  度：98.0%

新霉素   5g  Zidovudine  30516-87-1  中文名：齊多夫定  分子式：C10H13N5O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：
Decoquinate  18507-89-6  中文名：癸氧喹酯  分子式：C24H35NO5    兔兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Quinocetone  81810-66-4  中文名：喹烯酮  分子式：C18H14N2O3    兔超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Dimetridazole  551-92-8  中文名：二甲硝咪唑  分子式：C4H5N3O2    兔睪(rabbit TESTO)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Antipyrine  60-80-0  中文名：安替比林  分子式：C11H12N2O    兔抗酸性0酸酶5b(rabbit ACP-5b)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Tiamulin  55297-95-5  中文名：泰妙菌素  分子式：C28H47NO4S    兔調(diào)節(jié)蛋白(rabbit TM)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝
人宮頸上皮永生化細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)乳酸（lacticacid）測(cè)定試劑盒（測(cè)血清、組織等）（比色法）  Rhein  478-43-3  中文名：大黃酸  分子式：C15H8O6  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

肉毒桿菌(E/F型)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>)   48T                 Withaphysalin A  57423-72-0  中文名：  分子式：C28H34O6 

肉毒桿菌(A/B型)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>)   48T  Withaphysalin A  57423-72-0  中文名：  分子式：C28H34O6  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

溶酶體相關(guān)膜蛋白3   英文名稱(chēng)：   Human Lysosomal Associated membrane protein 3   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   LAMP3  3-Acetyl-2,5-dichlorothiophene  36157-40-1  中文名：  分子式：C6H4Cl2OS  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

溶菌酶標(biāo)準(zhǔn)品   Standard for lysozyme                 Ranitidine   66357-59-3  中文名：鹽酸雷尼替丁  分子式：C13H23ClN4O3S

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。