產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0925 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 肺癌;女性 |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人肺細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱:NCI-H727
種屬:人
來源:;女性
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE0925
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞人肺細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達到80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
4-Benzoyloxy-2-azetidinone 中文名:4-苯甲酰氧基-2-氮雜環(huán)丁酮 分子式:C10H9NO3 萊克多巴胺檢測試紙條(尿樣) Ractopamine test sip (urine)
4-Benzoyl-3-methyl-1-phenyl-5-pyrazolone 中文名:4-苯甲?;?/span>-3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮 分子式:C17H14N2O2 萊克多巴胺檢測試紙條(組織) Ractopamine test sip (Organization)
4-Benzoyl 4'-methyldiphenyl sulfide 中文名:4-苯甲酰-4'-甲基二苯硫醚 分子式:C20H16OS 霉素檢測試紙條(液態(tài)樣品) Chloramphenicol detection test sip (liquid sample)
4-Aza-*ndrostan-1-ene- 3-one-17carboxylic acid 中文名: 分子式:C19H27NO3 亞鹽快速測試盒 Niite rapid test case
4-Androstenediol 中文名:4-雄烯二醇 分子式:C19H30O2 氮快速測定試劑盒 niogen rapid determination kit
小鼠總腺原酸elisa試劑盒 小鼠總腺原酸試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠總腺原酸試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠總腺原酸試劑盒、小鼠總腺原酸elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 73-78-9 中文名:鹽酸利多卡因 分子式:C14H23ClN2O
小鼠總蛋白(TP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Nefopam 中文名:鹽酸奈福泮 分子式:C17H20ClNO
小鼠總膽固醇(TC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Nefopam 23327-57-3 中文名:鹽酸奈福泮 分子式:C17H20ClNO 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
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小鼠總補體elisa試劑盒 小鼠總補體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠總補體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠總補體試劑盒、小鼠總補體elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 73-78-9 中文名:鹽酸利多卡因 分子式:C14H23ClN2O 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
Toltrazuril 69004-03-1 中文名:托曲珠利 分子式:C18H14F3N3O4S 兔球蛋白M(rabbit IgM) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Paroxetine 78246-49-8 中文名:鹽酸帕羅西汀 分子式:C19H21ClFNO3 兔球蛋白E(rabbit IgE) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Temozolomide 85622-93-1 中文名:替莫唑胺 分子式:C6H6N6O2 兔白介素17(IL-17)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Pyrimethamine 58-14-0 中文名:乙胺嘧啶 分子式:C12H13ClN4 兔乙酰膽堿(ACh)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Pentoxyverine 23142-01-0 中文名:枸櫞酸噴托維林 分子式:C26H39NO10 兔去甲上腺素(NA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人肺細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)人總特異抗原(tPSA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 3,3-Dimethoxy-5α-androstan-17-one 3591-19-3 中文名:3,3-二甲氧基-5α-雄烷-17-酮 分子式:C21H34O3
人總特異抗原(tPSA)ELISAKit ELISA. 96T/48T 3,3',4,4'-Benzophenone tetracarboxylic dianhydride 2421-28-5 中文名:3,3',4,4'-二苯甲酮四甲酸二酐 分子式:C17H6O7 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
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人總蛋白(TP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 3,3',4,4'-Benzophenone tetracarboxylic dianhydride 中文名:3,3',4,4'-二苯甲酮四甲酸二酐 分子式:C17H6O7
人總膽汁酸elisa試劑盒 人總膽汁酸試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人總膽汁酸試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人總膽汁酸試劑盒、人總膽汁酸elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 3,4-Didehydrosapriparaquione 中文名: 分子式:C20H24O3
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。