產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE01280 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 成纖維細胞 |
細胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | 1×106 |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人成纖維細胞價格
簡稱:CNLMG-B5537SKIN
種屬:人
來源:成纖維細胞
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:1×106
單位:T25/瓶
貨號:AE01280
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細胞人成纖維細胞價格后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度:調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
3-Amino-3-phenyl-1-propanol 14593-04-5 中文名:3-氨基-3-苯基-1-丙醇 分子式:C9H13NO 度:98.0% 小鼠堿性0酸酶 英文名稱: Mouse Alkaline phosphatase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ALP
3-Amino-2-naphthoic acid 5959-52-4 中文名:3-氨基-2-萘甲酸 分子式:C11H9NO2 度:98.0% 小鼠同種異體移植炎性因子1 英文名稱: Mouse Allograft Inflamuatory Factor 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: AIF-1
3-Amino-2,6-piperidinedione 24666-56-6 中文名: 分子式:C5H9ClN2O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠生成素樣蛋白2 英文名稱: Mouse Angiopoietin like protein 2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ANGPTL2
3-Amino-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one 4149/6/8 中文名:3-氨基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮 分子式:C9H9N3O 度:98.0% 小鼠生成素樣蛋白4 英文名稱: Mouse Angiopoietin Like Protein 4 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ANGPTL4
3-Allylrhodanine 1457-47-2 中文名:3-烯丙基羅丹寧 分子式:C6H7NOS2 度:99.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白elisa試劑盒 小鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白試劑盒、小鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Conduritol A 526-87-4 中文名:牛彌菜醇A 分子式:C6H10O4
小鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Coumarin 6 中文名:香豆素 6 分子式:C20H18N2O2S
小鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISAKit ELISA. 96T/48T Convallatoxin 508-75-8 中文名:鈴蘭毒苷 分子式:C29H42O10 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠膽固醇(CH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Convallagenin B 17934-59-7 中文名:鈴蘭皂苷元B 分子式:C27H44O6 度:97.5% 關(guān)鍵詞:
小鼠膽固醇(CH)Elisa試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Convallagenin B 17934-59-7 中文名:鈴蘭皂苷元B 分子式:C27H44O6
轉(zhuǎn)移生長因子 -β2(TGF- b 2) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Quinestrol 152-43-2 中文名:炔雌醇環(huán)戊醚 分子式:C25H32O2
轉(zhuǎn)移生長因子 -β1(TGF- b 1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Quinestrol 152-43-2 中文名:炔雌醇環(huán)戊醚 分子式:C25H32O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
轉(zhuǎn)移生長因子 - a (TGF -a ) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Quinestrol 中文名:炔雌醇環(huán)戊醚 分子式:C25H32O2
轉(zhuǎn)移趨化生長因子β 英文名稱: Human ansforming Growth Factor β 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TGFβ Ritonavir 中文名:利托那韋 分子式:C37H48N6O5S2 度:98.0%
轉(zhuǎn)鐵蛋白(F)測定試劑盒(比濁法) 4-Acetamidophenol 中文名:對乙酰氨基酚 分子式:C8H9NO2
人成纖維細胞價格Repaglinide 135062-02-1 中文名:瑞格列奈 分子式:Repaglinide 人酶VB(CA5B)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human CA5B (Carbonic Anhydrase VB, Mitochondrial) ELISA Kit
3-Amino-2,6-piperidinedione 24666-56-6 中文名: 分子式:C5H9ClN2O2 人絲切蛋白1(CFL1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human CFL1(Cofilin 1, Non-Muscle) ELISA Kit
Methyl 2-bromomethyl-3-nitrobenzoate 98475-07-1 中文名: 分子式:Methyl 2-bromomethyl-3-nitrobenzoate 人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Ezetimibe BBP80298 中文名:依澤替米貝 分子式:C24H21F2NO3 人B細胞活化因子受體(BAFF-R)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Imatinib mesylate 220127-57-1 中文名:伊馬替尼 分子式:C30H35N7O4S 人內(nèi)皮細胞生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。