產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | AE0457 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 結(jié)腸癌 |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | 1×106 |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
使用方法:
收到細(xì)胞人細(xì)胞直銷后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人細(xì)胞直銷
簡稱:GEO
種屬:人
來源:
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:1×106
單位:T25/瓶
貨號(hào):AE0457
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3-(Hydroxymethyl)cyclopentanol 中文名: 分子式:C6H12O2 乙酰膽堿酯酶(AchE)試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
3-(Hydroxymethyl)-3-nitro-1-(4-octylphenyl)-1,4-butanediol 中文名: 分子式:C19H31NO5 組織及血液酸性0酸酶(ACP)試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣
3-(Bromomethyl)-2-cyclopropyl-4-(4'-fluorophenyl)quinoline 中文名: 分子式:C19H15BrFN 組織及血液堿性0酸酶(AKP/ALP)試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣
3-(Boc-Amino)piperidine 中文名: 分子式:C10H20N2O2 血清鐵 英文名稱: Human serum Lron 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Lron
3-(5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate (2R,3R)-2,3-dihydroxysuccinate 中文名: 分子式:C26H31N3O8 可溶性ENG/sCD105 英文名稱: Human soluble Endoglin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ENG/sCD105
小鼠抑制素A(mouse Inhibin A) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Catalpalactone 中文名: 分子式:C15H14O4
小鼠抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 N6-Benzyladenine 中文名:N6-芐基腺嘌呤 分子式:C12H11N5
小鼠抑制素A 英文名稱: Insulin A 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Inhibin A N6-Benzoyl-5'-O-(4,4'-dimethoxytrityl)-2'-deoxyadenosine 中文名:N6-苯甲?;?/span>-5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-2'-脫氧腺苷 分子式:C38H35N5O6 度:98.0%
小鼠抑瘤素mouse M(mouse OSM) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Benserazide 中文名:鹽酸芐絲肼 分子式:C10H16ClN3O5
小鼠抑瘤素Melisa試劑盒 小鼠抑瘤素M試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠抑瘤素M試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠抑瘤素M試劑盒、小鼠抑瘤素Melisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 N-Acetyl-5-hydroxytryptamine 1210-83-9 中文名:N-乙酰基-5-羥基色胺 分子式:C12H14N2O2 度:99.0% 關(guān)鍵詞:
Amitriptyline 549-18-8 中文名:鹽酸阿米替林 分子式:C20H24ClN 0酸化SMAD2/3抗體 英文名稱: Human Phosphor Mothers Against Decapeaplegic Homolog 2/3 aibody 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: PSMAD2/3 Ab
2-Aminophenyl phenyl sulfone 4273-98-7 中文名:2-氨基二苯砜 分子式:C12H11NO2S 0酸化核因子κB 英文名稱: Human phosphor-Nuclear Factor kappa B 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: pNFκB
8-Amino-2-naphthalenesulfonic acid 119-28-8 中文名:8-氨基-2-萘磺酸 分子式:C10H9NO3S 羧酸酯酶(CarE)測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/48樣
2-Amino-5-mercapto-1,3,4-thiadiazole 2349-67-9 中文名:2-氨基-5-巰基-1,3,4-噻二唑 分子式:C2H3N3S2 線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅱ活性測(cè)試盒 可見分光光度法 25管/24樣
2-Amino-5-nitrobenzophenone 1775-95-7 中文名:2-氨基-5-硝基二苯甲酮 分子式:C13H10N2O3 線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅲ活性測(cè)試盒 可見分光光度法 25管/24樣
人細(xì)胞直銷人脂蛋白脂酶elisa試劑盒 人脂蛋白脂酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人脂蛋白脂酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人脂蛋白脂酶試劑盒、人脂蛋白脂酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 2-Benzyl-2-(dimethylamino)-4'-morpholinobutyrophenone 中文名:2-芐基-2-(二甲基氨基)-4'-嗎啉基苯基丁酮 分子式:C23H30N2O2 度:98.0%
人脂蛋白脂酶(LPL)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human LPL (Lipoprotein Lipase) ELISA Kit 2-Aminophenyl phenyl sulfone 中文名:2-氨基二苯砜 分子式:C12H11NO2S 度:98.0%
人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 2-Benzylsuccinic acid 中文名: 分子式:C11H12O4
人脂蛋白脂酶(LPL)ELISAKit ELISA. 96T/48T 2-Benzyl-2-(dimethylamino)-4'-morpholinobutyrophenone 119313-12-1 中文名:2-芐基-2-(二甲基氨基)-4'-嗎啉基苯基丁酮 分子式:C23H30N2O2 度:98.0%
人脂蛋白關(guān)聯(lián)0脂酶A2(LpPLA2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human LpPLA2 (Phospholipase A2, Lipoprotein Associated) ELISA Kit 2-Aminothiazol-4-acetic acid 29676-71-9 中文名:2-氨基噻唑-4-乙酸 分子式:C5H6N2O2S
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。