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公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 成纖維細(xì)胞特價(jià)
簡稱：MH7A

種屬：人

來源：關(guān)節(jié)；成纖維細(xì)胞；SV40轉(zhuǎn)化；女性

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

貨號(hào)：AE0326
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞成纖維細(xì)胞特價(jià)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
2-Aminothiazol-4-acetic acid  中文名：2-氨基噻唑-4-乙酸  分子式：C5H6N2O2S  度：98.0%  小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Ampicillin Trihydrate  中文名：氨芐西林三水酸  分子式：C16H19N3O4S  度：98.0%  小鼠β酚(β-naphthol)LISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

2-Acetylfluorene  中文名：2-乙酰芴  分子式：C15H12O  度：98.0%  小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

1-Allyl-3,5-Dimethylpyrazole  中文名：1-烯丙基-3,5-二甲基吡唑  分子式：C8H12N2  度：98.0%  小鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

(1R,2S)-2-Amino-1,2-diphenylethanol  中文名：(1R,2S)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇  分子式：C14H15NO  度：99.0%  小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
維生素B2/核黃素   英文名稱：   Human Vitamin B2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   VB2  Androstadienedione  897-06-3  中文名：1,4-雄烯二酮  分子式：C19H24O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

維生素B2（VB2）檢測(cè)   Detection of malic dehydrogenase  Androstadienedione  中文名：1,4-雄烯二酮  分子式：C19H24O2  度：98.0%

維生素B1（VB1）檢測(cè)   The total amino acid (TAA) detection  Androstanolone 17-benzoate  1057-07-4  中文名：雄諾龍苯甲酸酯  分子式：C26H34O3 

微量游離血紅蛋白測(cè)試盒   ace free hemoglobin test case                 Retigabine  150812-12-7  中文名：瑞替加濱  分子式：C16H18FN3O2 

微量游離血紅蛋白（FHb）測(cè)定試劑盒（比色法）  Precursor of cefcapene diisopropylanmine salt  中文名：  分子式：C28H42N6O8S2
魚脫酶3（DIO3）ELISA檢測(cè)試劑盒   96T/48T   ELISA   組裝/原裝  Uzarigenin  466-09-1  中文名：  分子式：C23H34O4  度：97.5%  關(guān)鍵詞：  強(qiáng)心劑; ; 強(qiáng)心苷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

魚脫酶2（DIO2）ELISA檢測(cè)試劑盒   96T/48T   ELISA   組裝/原裝           Uzarigenin  466-09-1  中文名：  分子式：C23H34O4 

魚糖胺聚糖(GAG)ELISA檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Zolmitriptan  中文名：佐米曲普坦  分子式：C16H21N3O2  度：98.0%

魚尿苷二0酸葡萄糖酸轉(zhuǎn)移酶（UDPGT）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Zolmitriptan  中文名：佐米曲普坦  分子式：C16H21N3O2 

魚球蛋白M（IgM）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Zolmitriptan  139264-17-8  中文名：佐米曲普坦  分子式：C16H21N3O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：
成纖維細(xì)胞特價(jià)Nebivolol   中文名：鹽酸奈必洛爾  分子式：C22H26ClF2NO4  度：98.0%  小鼠分泌型球蛋白A(sIgA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Erlotinib   中文名：鹽酸埃羅替尼  分子式：C22H24ClN3O4  度：98.0%  小鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Empagliflozin  中文名：依帕列凈  分子式：C23H27ClO7  度：95.0%  小鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

3-[4-[(2-Chloro-5-iodophenyl)methyl]phenoxy]tetrahydro-furan  中文名：  分子式：C17H16ClIO2  度：98.0%  小鼠蛋白激酶A(PKA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Bortezomib  中文名：硼替佐米  分子式：C19H25BN4O4  度：98.0%  小鼠膽囊收縮素8（CCK-8）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。