產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE01122 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 胃黏膜;上皮細(xì)胞;自發(fā)永生;Wistar |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 大鼠 |
包裝規(guī)格 | 1×106 |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
使用方法:
收到細(xì)胞大鼠正常胃黏膜上皮細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 大鼠正常胃黏膜上皮細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱:RGM1
種屬:大鼠
來源:胃黏膜;上皮細(xì)胞;自發(fā)永生;Wistar
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:1×106
單位:T25/瓶
貨號:AE01122
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
2-Amino-9H-fluoren-9-one 3096-57-9 中文名:2-氨基-9H-芴-9-酮 分子式:C13H9NO 度:99.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠活化素A(Activin-A)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-Amino-6-methylbenzothiazole 2536-91-6 中文名:2-氨基-6-甲基苯并噻唑 分子式:C8H8N2S 度:98.0% 小鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-Amino-6-ethoxybenzothiazole 94-45-1 中文名:2-氨基-6-乙氧基苯并噻唑 分子式:C9H10N2OS 度:99.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠黃體生成素(LH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-Amino-6-chloropurine 10310-21-1 中文名:2-氨基-6-氯嘌呤 分子式:C5H4ClN5 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-Amino-6-chlorobenzothiazole 95-24-9 中文名:2-氨基-6-氯苯并噻唑 分子式:C7H5ClN2S 度:99.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠環(huán)0酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Ciprofloxacin 93107-08-5 中文名:鹽酸環(huán)丙沙星 分子式:C17H19ClFN3O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISAKit ELISA. 96T/48T Dihydroisotanshinone I 20958-18-3 中文名: 分子式:C18H14O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: ; ; 丹參; 紅根草; 二萜醌; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
小鼠超敏C反應(yīng)蛋白 英文名稱: Mouse C Reactive Protein HS 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: CRP-hs Mannioside A 中文名: 分子式:C39H62O13
小鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Ciprofloxacin 93107-08-5 中文名:鹽酸環(huán)丙沙星 分子式:C17H19ClFN3O3
小鼠叉頭框蛋白O3 英文名稱: Mouse Forkhead Box protein O3 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: FOXO3 N-Benzoyl-L-glutamic acid 6094-36-6 中文名:N-苯甲酰-L-谷氨酸 分子式:C12H13NO5
豬圓環(huán)病毒2型抗體ELISA檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 S-2-Benzothiazolyl2-amino-alpha-(methoxyimino)-4-thiazolethiolacetate 中文名:AE活性酯 分子式:C13H10N4O2S3 度:98.0%
豬游離脂肪酸 英文名稱: Porcine free Fatty Acid 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: FFA Stauntosaponin A 1417887-91-2 中文名: 分子式:C28H38O7 度:97.0% 關(guān)鍵詞:
豬病毒抗體IgGELISA試劑盒 48T/96T 試劑盒 組裝/原裝 S-2-Benzothiazolyl2-amino-alpha-(methoxyimino)-4-thiazolethiolacetate 中文名:AE活性酯 分子式:C13H10N4O2S3
豬病毒elisa試劑盒 豬病毒試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬病毒試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬病毒試劑盒、豬病毒eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Salvisyrianone 中文名: 分子式:C20H24O3 度:95.0%
豬病毒(JEV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T Rubioncolin C 132242-52-5 中文名: 分子式:C27H22O6 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
大鼠正常胃黏膜上皮細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)Racecadotril 中文名:消旋卡多曲 分子式:C21H23NO4S 植物纖維素酶(CE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Quinocetone 中文名:喹烯酮 分子式:C18H14N2O3 植物蔗糖含量試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
Quinestrol 中文名:炔雌醇環(huán)戊醚 分子式:C25H32O2 糖原含量試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
Quetiapine fumarate 中文名:富馬酸喹硫平 分子式:C46H54N6O8S2 α-淀粉酶試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣
Quetiapine 中文名:喹硫平 分子式:C21H25N3O2S β-淀粉酶試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。