產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | AE01032 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來(lái)源 | 肺; Lewis |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
器官來(lái)源 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
免疫類型 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
品系 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
生長(zhǎng)狀態(tài) | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
物種來(lái)源 | 大鼠 |
包裝規(guī)格 | 1×106 |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 大鼠肺泡上皮細(xì)胞特價(jià)
簡(jiǎn)稱:L2
種屬:大鼠
來(lái)源:肺; Lewis
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:1×106
單位:T25/瓶
貨號(hào):AE01032
基本特性:
( 1 )組織來(lái)源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞大鼠肺泡上皮細(xì)胞特價(jià)后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無(wú)菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開(kāi), 內(nèi)膜面向上,無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
(1S,2S)-1-Amino-2-Indanol 中文名:(1S,2S)-1-氨基-2-茚醇 分子式:C9H11NO 度:98.0% 小鼠細(xì)胞趨化因子 (mouse Lymphotactin) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 原裝進(jìn)口
Azithromycin dihydrate 中文名:阿奇霉素二水物 分子式:C38H72N2O12 度:98.0% 小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白 -1 (mouse MCP-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 奧地利 Bender
8-Azaguanine 中文名:8-氮雜鳥(niǎo)嘌呤 分子式:C4H4N6O 度:98.0% 小鼠白介素 -12 (mouse IL-12) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國(guó) Biosource
2,2'-Anhydro-5-methyluridine 中文名:2,2'-O-脫水-5-甲基尿嘧啶核苷 分子式:C10H12N2O5 度:98.0% 小鼠白介素 -12(p40) (mouse IL-12 p40) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國(guó) R&D
6-Benzyloxyindole 中文名:6-芐氧基吲哚 分子式:C15H13NO 度:98.0% 小鼠白介素 -12(p70) (mouse IL-12 p70) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 奧地利 Bender
細(xì)菌乙醇脫氫酶總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次 2-Amino-3-Formylchromone 中文名:2-氨基-3-甲?;?/span> 分子式:C10H7NO3 度:98.0%
細(xì)菌乙醇脫氫酶總活性(NDMA)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次 2-Amino-4-chlorobenzothiazole 中文名:2-氨基-4-氯苯并噻唑 分子式:C7H5ClN2S 度:98.0%
細(xì)菌乙醇比色法定量檢測(cè)試劑盒20次 2-Amino-5-mercapto-1,3,4-thiadiazole 2349-67-9 中文名:2-氨基-5-巰基-1,3,4-噻二唑 分子式:C2H3N3S2 度:98.0%
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2-n-Propyl-4-methyl-6-(1-methylbenzimidazole-2-yl)benzimidazole 中文名: 分子式:C19H20N4 度:98.0% 小鼠分泌型球蛋白elisa試劑盒 小鼠分泌型球蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠分泌型球蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠分泌型球蛋白試劑盒、小鼠分泌型球蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
2-Chloro-11-cyclopentyl-5H-benzo[e]pyrimido[5,4-b][1,4]diazepin-6(11H)-one 中文名: 分子式:C16H15ClN4O 度:98.0% 小鼠分泌型0脂酶elisa試劑盒 小鼠分泌型0脂酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠分泌型0脂酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠分泌型0脂酶試劑盒、小鼠分泌型0脂酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
5'-Deoxy-5-fluorocytidine 中文名: 分子式:C9H12FN3O4 度:99.0% 小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子elisa試劑盒 小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子試劑盒、小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Doxifluridine 中文名: 分子式:C9H11FN2O5 度:98.0% 小鼠分泌型球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。