產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | AE0271 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來(lái)源 | 肝;SV40轉(zhuǎn)化;Spragu BKDawley |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說(shuō)明書 |
器官來(lái)源 | 詳見說(shuō)明書 |
免疫類型 | 詳見說(shuō)明書 |
品系 | 詳見說(shuō)明書 |
生長(zhǎng)狀態(tài) | 詳見說(shuō)明書 |
物種來(lái)源 | 大鼠 |
包裝規(guī)格 | 1×106 |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 大鼠肝星形細(xì)胞
簡(jiǎn)稱:HSC-T6
種屬:大鼠
來(lái)源:肝;SV40轉(zhuǎn)化;Spragu BKDawley
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:1×106
單位:T25/瓶
貨號(hào):AE0271
基本特性:
( 1 )組織來(lái)源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無(wú)菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
phospho-ATF2 (Ser94) 英文名稱: 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 0.1ml
phospho-ATXN1(Thr236) 英文名稱: 磷酸化失調(diào)癥蛋白1抗體 0.1ml
ANKRD17 英文名稱: 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體 0.2ml
ALDH1A1 英文名稱: 胞質(zhì)乙醛脫氫酶1抗體 0.2ml
ARL3 英文名稱: ADP核糖基化樣因子ARL3抗體 0.2ml
15 Lipoxygenase 1 英文名稱: 花生四烯酸15脂氧合酶1抗體 0.2ml
ABC2 英文名稱: 增強(qiáng)蛋白2抗體 0.2ml
Alpha 1 microglobulin 英文名稱: α1微球蛋白抗體 0.2ml
Alpha B Crystallin 英文名稱: α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體 0.1ml
ADORA2B 英文名稱: 腺苷A2b受體/神經(jīng)生長(zhǎng)因子1受體抗體 0.1ml
ARK5 英文名稱: AMPK的相關(guān)蛋白激酶5抗體 0.2ml
ANP32C 英文名稱: 致瘤磷蛋白32相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
Adenosine deaminase 英文名稱: 腺苷脫氨酶抗體 0.1ml
ASB4 英文名稱: 含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族4抗體 0.2ml
ATRNL1 英文名稱: ATRNL1蛋白抗體 0.2ml
AFP4a 英文名稱: AFP4a蛋白抗體 0.2ml
APBB2 英文名稱: 鐵蛋白Fe65樣蛋白1抗體 0.2ml
APBB3 英文名稱: 鐵蛋白Fe65樣蛋白2抗體 0.2ml
APPBP2 英文名稱: β淀粉樣蛋白前體蛋白結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml
Aph-1b 英文名稱: 早老素穩(wěn)定因子樣蛋白/γ分泌酶組件蛋白APH1抗體 0.2ml牛津瓊脂基礎(chǔ) 100g 用于單核增生李斯特氏菌的選擇性分離(SN0184-2005)。
半固體瓊脂 250g 供細(xì)菌動(dòng)力觀察、菌種保存等用(GB 4789.4-2010和GB/T4789.8-2008)。
李氏增菌肉湯基礎(chǔ)(LB1,LB2) 250g 用于李斯特氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)(GB 4789.30-2010)。
改良的Mc Bride瓊脂MMA 250g 用于單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB/T4789.30-2003,SN0184-93)。
胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂 250g 廣泛用于細(xì)菌的培養(yǎng),特別用于食品中李斯特氏菌的分離培養(yǎng)(GB/T4789.30-2010和SN/T 0184-2005,I...
胰酪胨大豆酵母浸膏肉湯TSB-YE 250g 廣泛用于細(xì)菌的培養(yǎng),特別用于食品中李斯特氏菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.30-2010和SN0184-2005,ISO標(biāo)...
硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基(硝酸鹽胨水培養(yǎng)基) 250g 用于鑒別綠膿桿菌分解硝酸鹽產(chǎn)氣試驗(yàn)(GB15979-2002,《中華人民共和國(guó)藥典》2005年版,化妝品衛(wèi)生...
假單胞菌瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基/CN瓊脂 250g 用于飲用天然礦泉水檢驗(yàn)中銅綠假單胞菌的測(cè)定。(GB/T 8538-2008)
金氏B培養(yǎng)基 250g 用于飲用天然礦泉水中銅綠假單胞菌產(chǎn)熒光特性的測(cè)定。(GB/T 8538-2008)
綠膿菌素測(cè)定用培養(yǎng)基PDP(藥典) 250g 用于鑒別綠膿桿菌產(chǎn)生綠膿菌素試驗(yàn)。(《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版)
綠膿菌素測(cè)定用培養(yǎng)基(PDP) 250g 用于鑒別綠膿桿菌產(chǎn)生綠膿菌素試驗(yàn)(GB15979-2002,(化妝品衛(wèi)生規(guī)范微生物檢驗(yàn)方法2007版)。
溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養(yǎng)基 250g 用于綠膿桿菌及其它革蘭氏陰性非發(fā)酵菌的選擇性分離培養(yǎng)。(《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版)
十六烷三甲基溴化銨培養(yǎng)基 100g 用于綠膿桿菌及其它革蘭氏陰性非發(fā)酵菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB15979-2002,化妝品衛(wèi)生規(guī)范微生物檢驗(yàn)...
乙酰胺培養(yǎng)基 100g 用于革蘭氏陰性非發(fā)酵菌特別是綠膿桿菌的選擇性分離培養(yǎng)(化妝品衛(wèi)生規(guī)范微生物檢驗(yàn)方法2007版)。
明膠培養(yǎng)基(營(yíng)養(yǎng)明膠) 100g 供測(cè)定細(xì)菌液化明膠使用(GB15979-2002和GB/T4789.28-2003 中3.10,GB/T4789.35-2003)。
明膠培養(yǎng)基(營(yíng)養(yǎng)明膠) 100g 供測(cè)定細(xì)菌液化明膠使用(GB15979-2002和GB/T4789.28-2003 中3.10,GB/T4789.35-2003)。
L-酪氨酸營(yíng)養(yǎng)瓊脂配套試劑 10支/盒 L-酪氨酸營(yíng)養(yǎng)瓊脂基礎(chǔ)配套試劑
L-酪氨酸營(yíng)養(yǎng)瓊脂基礎(chǔ) 250g 用于蠟樣芽孢桿菌的L-酪氨酸分解試驗(yàn)。
Additives Tyrosine Agar 10支/盒
Tyrosine Agar Base 500g 用于蠟樣芽孢桿菌的L-酪氨酸分解試驗(yàn)。Tyrosine agar is used for tyrosine decompose test by B...
大鼠肝星形細(xì)胞甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂平板(MYP) 90mmX20個(gè) 用于蠟樣芽孢桿菌的菌數(shù)測(cè)定及分離培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003中4.64,GB/T4789.14-2003,SN0176-92和...
血平板 90mm×20個(gè) 用于營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)(GB 4789.10-2010,GB/T4789.37-2008 ,GB 4789.30-2...
甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂基礎(chǔ)MYP 250g 用于蠟樣芽孢桿菌的菌數(shù)測(cè)定及分離培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003中4.64,GB/T4789.14-2003,SN0176-92和...
胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基 250g 可廣泛應(yīng)用于細(xì)菌的培養(yǎng),特別用于消毒劑消毒效果的測(cè)試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養(yǎng)及蠟...
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。