產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | E1368 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來(lái)源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
器官來(lái)源 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
免疫類(lèi)型 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
品系 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
生長(zhǎng)狀態(tài) | |
物種來(lái)源 | |
包裝規(guī)格 | 瓶 |
純度 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)% |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)稱(chēng):主動(dòng)脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞
產(chǎn)品名稱(chēng):主動(dòng)脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞
規(guī)格:瓶
貨號(hào):E1368
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
主動(dòng)脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞 | E1368 |
帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來(lái)講,從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等,更大就是反應(yīng)器了。
帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過(guò)表面改性處理,適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用(如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用(一般性的傳代,保存細(xì)胞,為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等),25ml一般是用來(lái)復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng),還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng):
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中,加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細(xì)胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%(過(guò)量不足,過(guò)晚細(xì)胞狀態(tài)不佳,1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:3至1:5細(xì)胞一代,即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間,非細(xì)胞有絲分裂次數(shù))時(shí),去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細(xì)胞*,*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞,若胞質(zhì)回縮,細(xì)胞之間不再連接成片,表明此時(shí)細(xì)胞消化適度)進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù),然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO。
一般來(lái)講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng),另一方面可以在細(xì)胞凍存過(guò)程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80℃冰箱內(nèi)過(guò)夜。
*天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個(gè)月。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
以下是公司正在熱銷(xiāo)的相關(guān)產(chǎn)品:
氧化二銀,英文名或英文縮寫(xiě):Silver oxide,級(jí)別:特純,97%,規(guī)格:100克 HumanMaixmetalloproteinase3,MMP-3ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Amylose 250mg/1g/5g/25g原裝 Sigma A0512 人組織因子(TF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
URIDINE尿苷超純級(jí)50G58-96-8RT Human acetylcholine receptor aibody (AChRab) ELISA Kit 人乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒
同;9,10-二輕-9-氧 cnthronq;9(10H)-cnthrccqnonq;Ccrbothronq;cnthrcnonq 90-44-8 Humanai-toxoplasmaIgGaibody,ai-toxIgGELISAKit 人抗弓形體IgG抗體(ai-toxIgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
OTAC硬脂基基錄化5克色譜用,36~50目 HumanHeatShockProtein70,HSP-70ELISA試劑盒人熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
天青石蘭,英文名或英文縮寫(xiě):Celestine blue B,級(jí)別:高純,70%,規(guī)格:100克 人胰脂肪酶(PL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Acryl/Bis37.5:1,30%Solution 250ml 進(jìn)口原料自產(chǎn) 豬主要急性期蛋白(MAP)免疫試劑盒 Pig major ace phase protein,MAP ELISA Kit
ChlorosulphonpxenolS錄黃酚S5克CP HumanIerferonω,IFN-ωELISAKit 人ω干擾素(IFN-ω)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
纖維速酶 Cqllulcsq froM cspqrgillus nigq 901-24-8 Humanisletamyloidpolypeptide,IAPPELISA試劑盒人胰島淀粉樣多肽(IAPP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Zirconiumxy7noxide偏鋯酸500克3N,200目 組織二酯酶5(PDE5)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒10次
壬烯基丁二15毫升 RabbitapoproteinB100,apo-B100ELISA試劑盒兔載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鹽Spermine diphosphate hexahydrate Humanai-gasicparietalcellaibody,AGPA/PCAELISA試劑盒人抗胃壁細(xì)胞抗體(AGPA/PCA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
變色素2R100克 HumanBullousPemphigoid,BPELISAKit人大皰性類(lèi)天皰瘡抗體(BP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
二芐醚 Dibenzyl ,98% 103-50-4 100G 通用試劑 人Qa淋巴細(xì)胞抗原2(Qa-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鄰本二加醋二異丁酯 Diisobutyl phthclctq 84-69-2 兔子Ⅲ型前膠原氨基末端肽(PⅢNP)免疫試劑盒 Rabbit N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA Kit
主動(dòng)脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞馬來(lái)酰鉀鹽5克 MouseProstaticAcidPhosphatase,PAPELISA試劑盒小鼠酸性酶(PAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
半乳糖苷) ChickenHeatShockProtein60,HSP-60ELISA試劑盒雞熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
三氧化二鎵,英文名或英文縮寫(xiě):Gallium(III)oxide,級(jí)別:BR,99%,規(guī)格:1克 Human3-Niotyrosine,3-ELISAKit人3-硝基酪氨酸(3-)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
8-基本安-1-磺醋 8-cnilino-1-ncphclqnqsulfonic ccid 8-76-8 人膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
全反-2,6,10,15,19,23-六甲基-2,6,10,14,18,22-廿四碳六烯,英文名或英文縮寫(xiě):Squalene,級(jí)別:CP,98.5%,規(guī)格:25克 小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG)免疫試劑盒 Mouse 8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdG ELISA Kit
注意事項(xiàng):
主動(dòng)脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞(1)預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱;
(2)用75%酒精擦拭經(jīng)過(guò)紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手;
(3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
(4)點(diǎn)燃酒精燈:注意火焰不能太?。?/span>
(5)嚴(yán)格的無(wú)菌操作;
(6)貼壁細(xì)胞消化適度:消化的時(shí)間受消化液的種類(lèi)、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過(guò)程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
(7)傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作,每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染;
(8)傳代細(xì)胞瓶口每次打開(kāi)或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。