產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | E01304 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 口腔;成纖維細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 詳見說明書 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 貼壁 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | 瓶 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進口 | 是 |
產(chǎn)品簡稱:hOMF細(xì)胞
中文名稱:正常人口腔粘膜成纖維細(xì)胞
規(guī)格:瓶
種屬:人
來源:口腔;成纖維細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
單位:
貨號:E01304
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
hOMF細(xì)胞 | 瓶 | E01304 |
帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來講,從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等,更大就是反應(yīng)器了。
帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過表面改性處理,適合細(xì)胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用(如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細(xì)胞實驗用(一般性的傳代,保存細(xì)胞,為實驗提供細(xì)胞等),25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時的培養(yǎng),還有做原代細(xì)胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項:
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中,加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細(xì)胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達到80%~90%(過量不足,過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳,1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:3至1:5細(xì)胞一代,即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間,非細(xì)胞有絲分裂次數(shù))時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細(xì)胞*,*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞,若胞質(zhì)回縮,細(xì)胞之間不再連接成片,表明此時細(xì)胞消化適度)進行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進行計數(shù),然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達到80%~90%時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO。
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營養(yǎng),另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護細(xì)胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個月。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護劑,會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進而促使細(xì)胞死亡。
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1,5-萘二磺酸四水(>98%,BR) Naphthalene-1,5-disulfonic acid tetrahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98% 小鼠纖維介素蛋白(FGL2)ELISA試劑盒 ,英文名: FGL2 ELISA Kit
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細(xì)胞間粘附分子1 英文名稱: Human Iercellular Adhesion Molecule 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ICAM-1 Pramipexole dihydrochloride 104632-25-9 中文名:鹽酸普拉克索 分子式:C10H19Cl2N3S 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
細(xì)胞間黏附分子3elisa試劑盒 細(xì)胞間黏附分子3試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 細(xì)胞間黏附分子3試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:細(xì)胞間黏附分子3試劑盒、細(xì)胞間黏附分子3eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Arbidol hydrochloride 131707-23-8 中文名:鹽酸阿比朵爾 分子式:C22H26BrClN2O3S 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
細(xì)胞基因組提取試劑盒 Cell genome Exaction Kit Periplocoside F 119902-17-9 中文名: 分子式:C63H104O23
hOMF細(xì)胞Anthraquinone-2-carboxylic acid 中文名:蒽醌-2-羧酸 分子式:C15H8O4 度:98.0% 小鼠癌標(biāo)志物elisa試劑盒 小鼠癌標(biāo)志物試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠癌標(biāo)志物試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠癌標(biāo)志物試劑盒、小鼠癌標(biāo)志物elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Atrazine 中文名:阿特拉津 分子式:C8H14ClN5 度:98.0% 小鼠細(xì)胞趨化因子elisa試劑盒 小鼠細(xì)胞趨化因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠細(xì)胞趨化因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠細(xì)胞趨化因子試劑盒、小鼠細(xì)胞趨化因子elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
D(-)-Arginine 中文名:D-精氨酸 分子式:C6H14N4O2 度:98.0% 小鼠細(xì)胞功能相關(guān)抗原elisa試劑盒 小鼠細(xì)胞功能相關(guān)抗原試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠細(xì)胞功能相關(guān)抗原試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠細(xì)胞功能相關(guān)抗原試劑盒、小鼠細(xì)胞功能相關(guān)抗原elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Benserazide hydrochloride 中文名:鹽酸芐絲肼 分子式:C10H16ClN3O5 度:98.0% 小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子elisa試劑盒 小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子試劑盒、小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Trenbolone heptanoate 中文名: 分子式:C25H34O3 度:98.0% 小鼠癌標(biāo)志物-CA153ELISA試劑盒
注意事項:
hOMF細(xì)胞(1)預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱;
(2)用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手;
(3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
(4)點燃酒精燈:注意火焰不能太??;
(5)嚴(yán)格的無菌操作;
(6)貼壁細(xì)胞消化適度:消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
(7)傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進行一種細(xì)胞的操作,每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染;
(8)傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。