產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P63978 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
蛙屬虹彩病毒(RIV)PCR檢測方法(熒光-PCR法) |
50T |
BK-P63978 |
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
小鼠性激素結(jié)合球蛋白(mouse SHBG) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Methenolone acetate 中文名:美替諾龍醋酸酯 分子式:C22H32O3 度:98.0%
小鼠信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Methoxydienone 2322-77-2 中文名:沃氏物 分子式:C20H28O2
小鼠新生甲狀腺素elisa試劑盒 小鼠新生甲狀腺素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠新生甲狀腺素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠新生甲狀腺素試劑盒、小鼠新生甲狀腺素elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Methasterone 中文名:甲基屈他雄酮 分子式:C21H34O2 度:98.0%
小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Metamizole 中文名:安乃近 分子式:C13H16N3NaO4S 度:98.0%
小鼠心肽elisa試劑盒 小鼠心肽試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠心肽試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠心肽試劑盒、小鼠心肽eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Betamethasone 中文名:倍他米松 分子式:C22H29FO5
NK-92細胞,惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細胞 細胞系,Hep-3B細胞 CL-0184PANC-1(*癌細胞)5×106cells/瓶×2二硫代乙酰胺(>98%,BR)Dithiooxamide質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
中國倉鼠卵巢細胞;CTLA4 Ig-24脫氧核糖核酸酶 IIDNase II, from Pocine Pancreas質(zhì)量規(guī)格:分子生物學(xué)級
SLAMF1 Others Human CD150 細胞裂解液 (陽性對照) 5-硝基吲哚(>98.0%(GC))5-Nitroindole質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)鋁酞菁(>98.0%(T))Phthalocyanine Chloroaluminum質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
HEPACAM2 Others Rat 大鼠 HepaCAM2 細胞裂解液 (陽性對照) 酞菁鐵(II)(升華提)(>98.0%(T))Iron(II)
Phthalocyanine (purified by sublimation)質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
Y2細胞,小鼠成纖維細胞 順鉑耐藥株,COC1/CDDP細胞
食道上皮細胞裂解物HEEpiCL十五氟辛酸(約5mmol)[離子對色譜級]IPC-PFFA-8 (ca. 5mmol)質(zhì)量規(guī)格:用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對試劑
非洲綠猴腎細胞;CV-1十五氟辛酸,高等級[離子對色譜級]IPC-PFFA-8 HG質(zhì)量規(guī)格:用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對試劑
IGFBP3 Others Human IGFBP3 / IBP3 細胞裂解液 (陽性對照) 9,10-二甲氧基蒽-2-磺酸鈉鹽[離子對色譜級]IPA-DAS質(zhì)量規(guī)格:用于氨類的熒光離子對試劑
兔角膜前基質(zhì)層成纖維細胞;RCFBF敵草隆(標準品)Diuron質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,99.5%
MAPK1 Others Mouse 小鼠 ERK2 / MAPK1 / MAPK2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 茜素紅Alizarin
red質(zhì)量規(guī)格:AR
α-Spinasterol
481-18-5 中文名:α-菠甾醇 分子式:C29H48O 度:97.0% 關(guān)鍵詞: ; 栝樓; 豆甾烷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠抗線粒體抗體(mouse AMA) 作用: ELISA 規(guī)格:
48T/96T 進口分裝
α-Lipoic acid 1077-28-7 中文名:α-硫辛酸 分子式:C8H14O2S2 度:98.5% 關(guān)鍵詞: 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠抗核抗體(mouse ANA) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
α-Lapachone 4707-33-9 中文名: 分子式:C15H14O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 萘醌; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠緊張素II(mouse ANG II) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
α-D-Glucose 492-62-6 中文名:α-D-葡萄糖 分子式:C6H12O6 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠脂肪酸合成酶 英文名稱: Mouse Fatty Acid Syhase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: FAS
蛙屬虹彩病毒(RIV)PCR檢測方法(熒光-PCR法) 中文名:佐匹克隆 分子式:C17H17ClN6O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠促卵泡生成激素 英文名稱: Mouse Follicle Stimulating Hormone 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: FSH
本產(chǎn)品只適用于科研,