產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BK-P63999 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
沙門氏菌SPP-spyPCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
50T |
BK-P63999 |
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative
real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
小鼠elisa試劑盒 小鼠試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠試劑盒、小鼠elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 N,N-Bis(2-chloroethyl)-p-sulphonamide 中文名:N,N-雙(2-氯乙基)對(duì)甲苯磺酰胺 分子式:C11H15Cl2NO2S 度:98.0%
小鼠(mouse Insulin) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Catalpalactone 中文名: 分子式:C15H14O4 度:%
小鼠(INS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 N-(Quinoxalin-2-yl)-4-(quinoxalin-2-ylamino)benzenesulfonamide 中文名: 分子式:C22H16N6O2S 度:98.0%
小鼠(INS)ELISAKit ELISA. 96T/48T Methyltestosterone 58-18-4 中文名:甲基 分子式:C20H30O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
N-(Quinoxalin-2-yl)-4-(quinoxalin-2-ylamino)benzenesulfonamide 中文名: 分子式:C22H16N6O2S
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;C3H 10T1/2 2A62-[2-(2-t-Boc-氨基乙氧基)乙氧基]乙醇2-[2-(2-t-Boc-aminoethoxy)ethoxy]ethanol 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口原裝
95-C細(xì)胞,低轉(zhuǎn)移細(xì)胞 大鼠腎小管上皮細(xì)胞,NRK細(xì)胞 CL-0154MDCK(犬腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×22'-脫氧-2',2'-二氟尿嘧啶核苷2’,2’-Difluoro-2’-deoxyuridine 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口原裝,97%
TSCCa(舌鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2BMS 582664Brivanib alaninate質(zhì)量規(guī)格:>97%
HCF-c 類的*成纖維細(xì)胞(HCF) 500,000cells 神經(jīng)元細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)龍膽二糖Gentiobiose質(zhì)量規(guī)格:>96%,原裝進(jìn)口
腦內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)西洛多辛Silodosin質(zhì)量規(guī)格:>98%
大鼠肺泡巨噬細(xì)胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]三氧化二鉻(>99%,BR)Chromium (III) oxide質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
PLC/PRF/5細(xì)胞,亞歷山大細(xì)胞系 小鼠胚成纖維包裝細(xì)胞,PA317細(xì)胞 CL-0018A9(小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞)5×106cells/瓶×2四氧化三鈷(>99%,BR)Cobalt (II, III ) oxide質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
SPC-A-1(細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2乙酸鈷四水(>99.5%,BR)Cobaltous acetate, tetrahydrate質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,BR
HDMEC-c adult 微內(nèi)皮細(xì)胞(HDMEC)來自成年捐獻(xiàn)者 500,000cells 肝竇內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)鈷粉(>99%,BR)Cobaltous powder質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
小梁網(wǎng)細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)銅粉(>99.5%,BR)Copper powder質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,BR
2-Amino-4-phenylphenol 中文名:2-氨基-4-苯基苯酚 分子式:C12H11NO 內(nèi)皮生長因子受體2 英文名稱:
Rat Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫:
VEGF-R2
2-Amino-4-methylbenzothiazole 中文名:2-氨基-4-甲基苯并噻唑 分子式:C8H8N2S 大鼠氧化酶 英文名稱: Xahine oxidase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: XOD
2-Amino-4'-fluorobenzophenone 中文名: 分子式:C13H10FNO 小鼠肌動(dòng)蛋白β 英文名稱: Mouse Actin β 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ACTβ
2-Amino-4-chlorobenzothiazole 中文名:2-氨基-4-氯苯并噻唑 分子式:C7H5ClN2S 小鼠?;碳さ鞍?span> 英文名稱: Mouse Acylation Stimulating Protein 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ASP
沙門氏菌SPP-spyPCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)2-Amino-3-methylbenzoic acid 中文名:2-氨基-3-甲基苯甲酸 分子式:C8H9NO2 內(nèi)皮生長因子受體 1(VEGF-R3) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 R&D