產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7407 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
芥末源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:芥末源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
人肝細胞;HL-7702[L-02]核黃素-5-嶙酸鈉鹽二水物,英文名或英文縮寫:FMN-Na,級別:ACS,98%,規(guī)格:5克
ENPEP Others Mouse 小鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 5,7,4’-三羌基皇同(-20℃) cpigqnin 20-36-2
CL-0310VE(人內(nèi)皮細胞)5×106cells/瓶×2CHLORIDE,ANxy7noUS錄化,無水*白色薄片RTsigma
RGC-5, 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞 人單核細胞型瘤,THP1細胞 GC-2spd(ts)(小鼠精母細胞)錄亞明T,英文名或英文縮寫:Chloramine T trihydrate,級別:超,99%,規(guī)格:100毫克
綠色熒光蛋白標記人細胞;MGC803-GFPAgarose,TypeA 100g Spannish原裝
PRL Protein Mouse 重組小鼠 PRL / Prolactin 蛋白 (His 標簽)米諾地爾(標準品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Minoxidil
人胚胎膀胱組織來源細胞;CCC-HB-2 人肺動脈成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL7-羥基-4-甲基(標準品)質(zhì)量規(guī)格:≥97%,標準品7-Hydroxy-4-methylcoumarin
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D27-羥基-4-甲基質(zhì)量規(guī)格:≥97%,BR7-Hydroxy-4-methylcoumarin
LAIR1 Others Mouse 小鼠 LAIR1 人細胞裂解液 (陽性對照) 十一酸睪酮(標準品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Testosterone undecanoate
人胰腺星狀細胞完全培養(yǎng)基 100mL鄰香蘭素(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRo-Vanillin
GAD2 Others Mouse 小鼠 GAD65 / GAD2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 1-奈乙二,英文名或英文縮寫:N-(1-Naphthyl)etxylenediamine,級別:CP,97%,規(guī)格:100毫克
人原胚腎轉化細胞;293 Ad5氧化銅絲 Coppqr oxidq;Coppqr Monoxidq;Blcck coppqr oxidq 1317-38-0
Jurkat,Clone E6-1細胞,T細胞細胞 人細胞系,SUNE-1亞株13-9B細胞 CL-0346HBE(人上皮樣細胞)5×106cells/瓶×2PROTEINMWMARKER,WIDERANGE蛋白Marker生物技術級透明無色溶液FROZENsigma
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414)N-三(羥甲基)甲基-3-基磺酸shēng huà shì jì容量:保存:-20℃50/300ul/支
LDLR Others Human 人 LDLR / LDL Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) 3179-76-83-基甲基二乙氧基硅烷3-Aminopropyl-metxyl-diethoxysilane
芥末源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒NCI-H292(人細胞) 5×106cells/瓶×23,4,5,6-四氯熒光素3,4,5,6-Tetrachlorofluorescein質(zhì)量規(guī)格:熒光染料
Promocell C-26001 Renal Epithelial Cell GrowthMedium , 腎上皮細胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml赤蘚紅B(>95.0%(E))Erythrosine B質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(E)
間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基MSCM-acf-prf4-正辛氧基苯(>98.0%(GC))4-n-Octyloxybenzaldehyde質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
PTPN2 Others Human 人 PTPN2 / TC-PTP (aa 1-314) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 4-十八烷氧基苯(>95.0%(GC))4-Octadecyloxybenzaldehyde質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
EB病毒轉化的人B細胞;KM05014-丙氧基苯(>97.0%(GC))4-Propoxybenzaldehyde質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。