產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7417 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
操作流程:
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:牦牛源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
牦牛源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
CSNK1G2 Others Human 人 CSNK1G2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) L-酰-L-谷酰,英文名或英文縮寫:Alu-Gln,級別:BR,99%,規(guī)格:5克
長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細胞;201184三溴新務(wù)醇 3-Bromo-2,2-bis(bromomqthyl)propcnol 2012/9/2
BHK細胞,幼倉鼠腎細胞 人細胞,CFPAC-1細胞 CM-R093大鼠胎兒真皮成纖維細胞完全培養(yǎng)基100mLGLYCEROLGELLOADINGDYE,5X5X核酸電泳上樣緩沖液,30%甘油超級暗紫色微粘稠液體COLDsigma
大鼠胰腺外分泌腺細胞;AR42J5′-CTP,3Na5-胞嘧啶核苷三嶙酸三鈉鹽500UBR,95%
RTN4R Others Human 人 RTN4R / NOGOR 人細胞裂解液 (陽性對照) 109-43-3癸二酸二丁酯Dibutyl Sebacate (AS)
PECAM1 Others Mouse 小鼠 PECAM1 / CD31 人細胞裂解液 (陽性對照) 蘆薈大黃素(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Aloeemodin
微內(nèi)皮細胞cDNAHCMEC cDNA細胞色素C(馬源)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,來源馬心Cytochrome C
SLPI Others Human 人 SLPI 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 細胞色素C(牛源)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,來源牛心Cytochrome C
大鼠小腸隱窩上皮細胞;IEC-6細胞色素C(豬源)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,來源豬心Cytochrome C
95-D細胞,高轉(zhuǎn)移細胞 人細胞,M2e細胞 正常大鼠腎細胞;NRK盧立康唑質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRLuliconazole
HCCC-9810細胞,人膽管細胞型細胞 小鼠細胞G-CSF依賴性,NFS-60細胞 水貂肺上皮細胞;Mv.1.Lu(NBL-7)GENE-PAGEPLUS5%,WITHTTEBUFFER 5% GENE-PAGE PLUS 含TTE生物技術(shù)級COLDsigma
MDBK(牛腎細胞) 5×106cells/瓶×2黃蓍樹膠粉 Gum tragacanth powder 9000-65-1 100G 通用試劑
Promocell C-22170 Myocyte GrowthMedium KIT, 心肌細胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml單唾液神經(jīng)節(jié)苷酯(-20℃) GcNGLIOSIDq GM1, cMMONIUM ScLT, BOVINq 37728-47-7
kasumi-1, 人細胞株Atr莠去津5克超,100mM
ART4 Others Mouse 小鼠 Art4 / CD297 人細胞裂解液 (陽性對照) 32449-92-6D-葡糖醛酸內(nèi)酯D-Glucurone
牦牛源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒家豬皮膚細胞;SSC-S14-苯基-1,2,4-三唑啉-3,5-二酮(含氮量:23.50-24.30 %)4-Phenyl-1,2,4-triazoline-3,5-dione質(zhì)量規(guī)格:含氮量:23.50-24.30 %
IFNGR1 Others Mouse 小鼠 IFNGR1 / CD119 人細胞裂解液 (陽性對照) N-叔丁基-α-苯基硝酮(>98.0%(HPLC)(T))N-tert-Butyl-α-phenylnitrone質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)
HT-29 人細胞4-羥基氨苯蝶啶4-Hydroxy Triamterene質(zhì)量規(guī)格:美國進口
U-118 MG人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤 U-118 MG of brain asocytic blastoma DMEM培養(yǎng)基+10%FBS4-羥基氨苯蝶啶硫酸鈉鹽4-Hydroxy Triamterene Sulfate, Salt質(zhì)量規(guī)格:美國進口
VEGFA Protein Rat 重組大鼠 VEGF164 / VEGFA 蛋白2,4-二氨基-6-苯基-7-蝶啶2,4-Diamino-6-phenyl-7-pteridinol質(zhì)量規(guī)格:美國進口
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。