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Ar 1193 電擊感受態(tài)細胞

起訂量 (瓶)價格

1-10￥2350 /瓶

≥10￥1250 /瓶

品牌：帛科

產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)

貨號：BK-G63321

發(fā)布日期： 2021-02-21
更新日期： 2024-11-22

發(fā)送咨詢信息

產(chǎn)品詳請

產(chǎn)地	進口、國產(chǎn)
保存條件	低溫冷藏
品牌	帛科
貨號	BK-G63321
用途	產(chǎn)品僅用于科研
組織來源	詳見說明書
細胞形態(tài)	詳見說明書
是否是腫瘤細胞	否
CAS編號
保質(zhì)期	詳見說明書
器官來源	詳見說明書
免疫類型	詳見說明書
品系	詳見說明書
生長狀態(tài)	詳見說明書
物種來源	詳見說明書
包裝規(guī)格	50ul10 50ul50
純度	%
是否進口	是

規(guī)格參數(shù)：

產(chǎn)品名稱：Ar 1193 電擊感受態(tài)細胞
規(guī)格：50ul*10 50ul*50
分類：發(fā)根農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞
用途：生化試劑（用于科研試驗研究）
儲存條件: -70℃保存，必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年，-70℃保存至少6個月。
外觀:（性狀）干冰運輸，單加10kg干冰費
單位: 袋

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項：
1. 感受態(tài)細胞*在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時應輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應減少最終用于涂板的菌量。
同一批感受態(tài)細胞，用含目的片段的T載體質(zhì)粒轉(zhuǎn)化（陽性對照）能長出密密麻麻的菌落，而用另一種載體和目的片段的連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化，卻一個菌都沒長出來，重復了三次都這樣。請問這是感受態(tài)細胞的制作不過關，還是連接出了問題？哪個可能性大些？
答：應該是連接的問題。所有連接反應建議同時轉(zhuǎn)化酶切后的質(zhì)粒作為另一個陰性對照，確定酶切是否完全。同時連接前請確定質(zhì)粒和片段濃度達到最小連接量的要求。
感受態(tài)細胞放到-80冰箱了有半年了，還能用來轉(zhuǎn)化質(zhì)粒嗎？
答：如-80冰箱儲存過程中沒有發(fā)生凍融的情況，是可以用來轉(zhuǎn)化的，但是由于凍存時間過長，轉(zhuǎn)化效率會有所下降，如果用于普通的質(zhì)粒重轉(zhuǎn)或TA克隆等高效連接體系也是可以的，如珍貴的樣品請選用較為新鮮的感受態(tài)細胞。
操作方法：
1. DH5α感受態(tài)細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)粒或連接產(chǎn)物）并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

原（標準品）質(zhì)量規(guī)格：UV>95%,分析標準品Procyanidin ELISAKitcTn-Ⅰ人心肌肌鈣蛋白Ⅰ規(guī)格：48T/96T 凝血因子Ⅷ(FⅧ)ELISA試劑盒，英文名： FⅧ ELISA Kit

胡椒堿質(zhì)量規(guī)格：HPLC>97%,BRPiperine 小鼠谷酸脫羧酶自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)ELISA試劑盒，英文名： GAD-Ab-IgM ELISA Kit Rabbitoxidizedlowdensitylipoprotein,OxLDLELISA試劑盒兔子氧化(OxLDL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

透明質(zhì)酸,玻尿酸(分子量80萬-150萬)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR,M.W:80萬-150萬Hyaluronic Acid 大鼠抗內(nèi)皮細胞抗體(AECA)ELISA檢測試劑盒Ratai-endothelialcellaibody,AECAELISAKit 96T/48T HumanArgyrophilicnucleolarorganizerregionproteins,Ag-NORsELISA試劑盒人核仁形成區(qū)嗜銀蛋白(Ag-NORs)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

透明質(zhì)酸,玻尿酸,醣醛酸（分子量3K）質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR,M.W:3000Hyaluronic Acid 人白細胞活化黏附因子(ALCAM)試劑盒 Human ALCAM ELISA Kit HumanComplemefragme3c，C3cELISAKit人補體片段3c(C3c)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Mouse15-lipoxygenase,15-LO/LOXELISA試劑盒小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 34420-19-4千金子二萜醇 Lathyrol

小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶(ELA2)ELISA試劑盒，英文名： ELA2 ELISA Kit 88206-46-6羌活醇說明書 Notopterol

犬球蛋白E(IgE)ELISA檢測試劑盒CanineImmunoglobulinE,IgEELISAKit 96T/48T 78281-02-4羥基紅花黃色素A品牌 Hydroxysafflor yellow A

犬軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)試劑盒 Dog cailage oligomeric maix protein,COMP ELISA kit 34540-22-2羥基積雪草苷規(guī)格 Madecassoside

英文名稱HumanFree-T4ELISAKit人游離甲狀腺素(Free-T4)規(guī)格：96T/48T 18449-41-7羥基積雪草酸 Madecassic acid

484-12-8蛇床子素 Osthole 植物葡萄糖6-1酸異構(gòu)酶(glucose-6-phosphateisomerase;GPI)電泳分析試劑盒5

483-90-9毛兩面針素規(guī)格 Toddalolactone 植物尿苷二1酸葡萄糖焦1酸化酶(UDPglucosepyrophosphorylase)活性比色法定量檢測試劑盒20

483-15-8二氫小檗堿 Dihydroberberine 植物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)粗提分離試劑盒10

Ar 1193 電擊感受態(tài)細胞482-89-3靛藍 Indigo 植物膜性囊泡(RSOV和IOV)制備試劑盒20

482-83-7黃檀素說明書 6-Hydroxy-7-methoxy-4-phenylcoumarin 植物彌散吲哚-3-乙酸(IAA)比色法定量檢測試劑盒(包括萃取)20

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