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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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病毒N1亞型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BK-P63216
  • 價格: ¥3800/瓶
  • 發(fā)布日期: 2021-01-22
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BK-P63216
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

病毒N1亞型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)

50T

BK-P63216

實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix
2mM
4 μl
引物110pM
2 μl
引物210pM
2 μl     Taq
酶 (2U/μl
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl
1 μl
ddH2O 50 μl

PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA
沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2.
標記 6 個離心管,分別為 7,65,4,3,2。
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
內(nèi)皮生長因子受體2   英文名稱:   Rat Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 2   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   VEGF-R2  Otophylloside O  中文名:  分子式:C56H84O20  度:96.5%

內(nèi)皮生長因子受體2   英文名稱:   Human Kinaseinse Domain Receptor/VEGFR2   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   KDR  4,4'-Dimethoxytrityl chloride  40615-36-9  中文名:4,4'-二甲氧基三苯基氯甲烷  分子式:C21H19ClO2

內(nèi)皮生長因子受體 2(VEGF-R2)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝     Otophylloside B 4'''-O-β-D-cymaropyranoside  171422-85-8  中文名:  分子式:C56H90O19

內(nèi)皮生長因子受體 1(VEGF-R3)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   美國 R&D  Otophylloside F  中文名:青陽參苷F  分子式:C48H76O16  度:95.0%

內(nèi)皮生長因子受體 1(VEGF-R1)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   奧地利 Bender     Otophylloside B 4'''-O-α-L-cymaropyranoside  171422-82-5  中文名:  分子式:C56H90O19
JB6-C30細胞,小鼠皮膚細胞 J82(細胞) 犬腎細胞;MDCK/IgR苯并-15-冠5-(>98.0%(GC))Benzo-15-crown 5-Ether質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)

EFNA1 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 標簽)苯并-12-冠4-(>98.0%(GC))Benzo-12-crown 4-Ether質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)

CAL-27(舌鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 原代骨細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml苯并-18-冠6-(>96.0%(GC))Benzo-18-crown 6-Ether質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC)

骨骼肌成肌細胞HSkMM12-冠-4-(>95.0%(GC))12-Crown 4-Ether質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)

CSNK1G2 Others Human  CSNK1G2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 15-冠-5-(>97.0%(GC))15-Crown 5-Ether質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)
293XL-hTLR9胚腎細胞 Human embryonic kidney cell line 293XL-hTLR9 DMEM+10% Hyclone 滅活血清+10 μg/ml Blasticidin鹽酸依匹斯汀Epinastine HCl質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

BMP2 Protein Human 重組 BMP-2 / BMP2A 蛋白鹽酸依匹斯汀(標準品)Epinastine HCl質(zhì)量規(guī)格:>99%,標準品

滑膜細胞(HS)( 5×105 ) H9c2大鼠心肌細胞(ATCC來源) Rattus依普利酮Eplerenone質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng)

雜交瘤(B類);Z1510C6D10F4G6依普利酮(標準品)Eplerenone質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品

海馬趾神經(jīng)細胞(HN-h)(1×106)*度酸Etodolac質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
6-Hydroxyrubiadin  中文名:6-羥基甲基異茜草素  分子式:C15H10O5    Acetaldehydeoxime

6-Fluoro-3-(4-piperidinyl)-1,2-benzisoxazole   中文名:  分子式:C12H14ClFN2O    乙酰胺   100g

6-Deoxy-3-O-methyl-β-allopyranosyl(1→4)-β-cymaronic acid δ-lactone  中文名:  分子式:C14H24O8    Acetamide

病毒N1亞型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)6-Chloroguanine riboside  中文名:6-氯鳥嘌呤核苷  分子式:C10H12ClN5O4    乙脫氫酶(ALDH)試劑盒   紫外分光光度法   50管/48樣

6-Benzyloxypurine  中文名:6-芐氧基嘌呤  分子式:C12H10N4O    輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒   可見分光光度法   50管/24樣
實驗注意事項:
1
RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR



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