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公司產(chǎn)品僅用于科研實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
公司產(chǎn)品僅用于科研使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

SNU-398細胞，人細胞 人類胚胎*表皮細胞,H293T細胞 視網(wǎng)膜色素上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)3-基shēng huà shì jì容量：1公斤

大耳山羊腎細胞;LDG-2二磺酸鈉 Diphenylaminesulfonic acid  salt 6152-67-6 1G 通用試劑

SFRP1 Others Human 人 sFRP1 / SARP2 人細胞裂解液 (陽性對照) 柯柏膠;硬樹脂;礦樹脂 GuM copcl;Kcuric guM;cniMq(soft copcl);Kcuric;Cowriq;Copcl; 9000-14-0

CL-0047C6(大鼠細胞)5×106cells/瓶×2NEUTRALREDCERTIFIED中性紅生物染料級暗綠色精細粉末RTsigma

CSAG1 Others Human 人 CSAGE / CSAG1 人細胞裂解液 (陽性對照) 13517-06-1二水合wo7ium iodide dihydrate
臍平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)酮基他米巴羅汀Keto Tamibarotene質(zhì)量規(guī)格：美國進口

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/common magpie/Hong Kong/5052/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細胞裂解液 (陽性對照) ent-伏立康唑ent-Voriconazole質(zhì)量規(guī)格：美國進口

小鼠正常肝細胞;NCTC 1469 [NCTC1469]外消旋左旋甲狀腺素鈉DL-Levothyroxine 質(zhì)量規(guī)格：美國進口

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA 小鼠神經(jīng)細胞瘤與大鼠神經(jīng)之融合細胞，NG108-15[108CC15]細胞 LM8細胞，C3H小鼠細胞β-煙酰胺腺嘌呤二核苷1酸酸鈉鹽β-Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate  salt 質(zhì)量規(guī)格：美國進口

胚;MRC-5硫酸腺嘌呤二水化合物Adenine Hemisulfate Dihydrate質(zhì)量規(guī)格：美國進口
小鼠漿細胞瘤;MPC-11四丁基化銨(離子對色譜級)Tetrabutylammonium iodide質(zhì)量規(guī)格：離子對色譜級

PTGDS Others Human  PTGDS / L-PGDS 細胞裂解液 (陽性對照) 三辛胺(離子對試劑)Trioctylamine質(zhì)量規(guī)格：離子對試劑

食管平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL草酸鈉容量分析用溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(0.05M) oxalate solution質(zhì)量規(guī)格：0.05M

7WPS1細胞，APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株 變異鏈球菌 兔間變表皮鱗株;VX2剛果紅(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97.0%(HPLC))Congo red質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97.0%(HPLC)

CXCL16 Protein Rat 重組大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)正癸酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))Decanoic acid質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)
人細胞;1301地蒽酚（標(biāo)準(zhǔn)品）ANTHRALIN質(zhì)量規(guī)格：含量測定

CSF2 Others Rat 大鼠 GM-CSF / CSF2 人細胞裂解液 (陽性對照) 對羥基（標(biāo)準(zhǔn)品）4-Hydroxyphenylacetamide質(zhì)量規(guī)格：供檢查用

CM-H009人上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL奮乃靜（標(biāo)準(zhǔn)品）Prochlorperazine質(zhì)量規(guī)格：含量測定

SW480細胞，人細胞 人色素瘤細胞,MV3細胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;Mao奮乃靜Prochlorperazine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

鯉病毒2型PCR試劑盒HBL-100(人整合SV40基因的上皮細胞) 5×106cells/瓶×2TGX221TGX-221質(zhì)量規(guī)格：>98%,特異性的p110β抑制劑