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實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

CL-0092HBZY-1(大鼠腎小球系膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2Isooctane基5克AR，98%

CLEC14A Others Rat 大鼠 CLEC14A / EGFR-5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 雙 Abate 3383-96-8 10MG 標(biāo)準(zhǔn)品

人海馬趾神經(jīng)細(xì)胞裂解物HN-h L芴氧羰基-S-酰安基-L-半胱安醋 Fmoc-S-ccqtcmidomqthyl-L-cystqinq 86060-81-3

Caov-3細(xì)胞，人細(xì)胞 大鼠細(xì)胞,INS-1細(xì)胞 神經(jīng)元細(xì)胞Many types of cells包裝：5 ×105方(1ml)助壯素，英文名或英文縮寫：Mepiquat chloride，級(jí)別：高，99%，規(guī)格：1克

Chang liver (CCL13) (人張氏肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×28050-81-5二甲基硅油Simetxicone
貓星形腦膠質(zhì)細(xì)胞;PG-4(S+L-)苯并[a]蒽(>98.0%(GC))Benz[a]anthracene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

CDCP1 Others Human  CDCP1 / CD318 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 1H-環(huán)五[l]菲(>95.0%(GC))1H-Cyclopenta[l]phenanthrene質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL9-氨基喜樹堿9-Aminocamptothecin質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

A-431細(xì)胞，表皮癌細(xì)胞 嗜血桿菌 BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1(R)-7-乙基喜樹堿(R)-7-Ethyl Camptothecin質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

CCL18 Protein Human 重組 CCL18 / PARC / MIP4 蛋白 (His 標(biāo)簽)7-乙基-喜樹堿-d37-Ethyl-d3-camptothecin質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的胚腎細(xì)胞;293E外消旋5-羥甲基去異丙基托特羅定-d6rac 5-Hydroxymethyl Desisopropyl Tolterodine-d6質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

CD38 Others Rat 大鼠 SCARB3 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 外消旋去異丙基托特羅定rac Didesisopropyl Tolterodine質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

腎管狀上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL外消旋5-羥甲基托特羅定rac 5-Hydroxymethyl Tolterodine質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

B16F1細(xì)胞，小鼠色素瘤細(xì)胞 MRC-5(胚肺細(xì)胞) Asp2胚胎腎細(xì)胞轉(zhuǎn)化細(xì)胞;FC33外消旋5-羧基去異丙基托特羅定rac 5-Carboxy Desisopropyl Tolterodine質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

CCL6 Protein Mouse 重組小鼠 CCL6 / C-C motif ligand 6 蛋白 (His 標(biāo)簽)S-(-)-托特羅定S-(-)-Tolterodine質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
mOPC, 小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞 MSU-2細(xì)胞 QSG-7701(肝細(xì)胞)多菌靈(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%)Carbendazim質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%

人細(xì)胞;A498(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%)Carbaryl質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%

IL22RA2 Others Human 人 IL22BP / IL22RA2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸水蘇堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Stachydrine 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

人毛細(xì)胞總RNAHHDPC NA異水飛薊賓(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%)Isosilybin質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%

ITGA8 & ITGB1 Others Human 人 ITGA8 & ITGB1 Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 3,3’-二沒食子酸酯茶黃素(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.0%(HPLC))Theaflavin 3,3′-digallate質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.0%(HPLC)

漢氏巴爾通體（漢塞巴爾通體、貓抓病、貓抓熱）探針法熒光定量PCR試劑盒本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。