本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
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產(chǎn)品名稱(chēng)
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規(guī)格
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貨號(hào)
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病毒H3N2亞型PCR檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法）
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50T
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BK-P63214
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實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專(zhuān)用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 D(VEGF-D) 作用： ELISA
規(guī)格： 96T 美國(guó) R&D Otophylloside B 4'''-O-α-L-cymaropyranoside 171422-82-5
中文名： 分子式：C56H90O19 度：97.5% 關(guān)鍵詞： 孕甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 D(VEGF-D) 作用： ELISA
規(guī)格： 48T/96T
進(jìn)口分裝 Otophylloside B 4'''-O-β-D-cymaropyranoside 中文名： 分子式：C56H90O19 度：98.0%
內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 C(VEGF-C) 作用： ELISA
規(guī)格： 96T 奧地利 Bender Otophylloside B 4'''-O-α-L-cymaropyranoside 中文名： 分子式：C56H90O19
內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 A(VEGF-A) 作用： ELISA
規(guī)格： 96T 奧地利 Bender Otophylloside B 4'''-O-α-L-cymaropyranoside 中文名： 分子式：C56H90O19 度：97.5%
內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 A(VEGF-A) 作用： ELISA
規(guī)格： 48T/96T
進(jìn)口分裝 Androstanolone 17-benzoate 中文名：雄諾龍苯甲酸酯 分子式：C26H34O3
TNFSF13B Others Human BAFF / TNFSF13B 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 試劑質(zhì)量規(guī)格：ARDithizone
tTA基因修飾的小鼠*癌細(xì)胞(B類(lèi));Pan02-CAG-tTA-4B3鎂試劑I質(zhì)量規(guī)格：ARMagnesonI
CPB2 Others Mouse 小鼠 Carboxypeptidase B2 / CPB2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鉭標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)質(zhì)量規(guī)格：1000μg/mlTantalum
standard
BT474 導(dǎo)管癌細(xì)胞碲標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)質(zhì)量規(guī)格：1000μg/mlTellurium
standard
WI-38胚肺細(xì)胞 WI-38 in human embryo lung
cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS鋱標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/mL,基體:10%HCl)質(zhì)量規(guī)格：1000μg/mL,基體:10%HClTerbium
standard
293E(胚腎細(xì)胞(EBNA1基因修飾)) 5×106cells/瓶×2 原代神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of
cells包裝：500/250/100ml精胺氮氧化加合物Spermine NONOate質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
絨毛膜內(nèi)皮細(xì)胞HVCEC精胺二1酸鹽Spermine
diphosphate salt質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
PDE2A Others Human
PDE2A / CGS-PDE (aa 215-900) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 雷尼替丁-N,S-二氧化物Ranitidine-N,S-dioxide質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7去甲基雷尼替丁Desmethyl Ranitidine質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
Ha Fe細(xì)胞，羊膜細(xì)胞 高分化腺癌細(xì)胞系,THC-8307細(xì)胞 CM-R045大鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL雷尼替丁N-氧化物Ranitidine
N-Oxide質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
6-Aminoindole
中文名：6-氨基吲哚 分子式：C8H8N2 AmmoniumChloride 500g
6-Aminoindazole 中文名：6-氨基吲唑 分子式：C7H7N3 乙二醇-雙-(2-基乙基)四乙酸 10g
6-Amino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic acid 中文名：6-氨基-4-羥基-2-萘磺酸 分子式：C10H9NO4S EGTA
50g
病毒H3N2亞型PCR檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法）6'-Amino-3',4'-(methylenedioxy)acetophenone 中文名：6'-氨基-3',4'-(亞甲基二氧代)苯乙酮 分子式：C9H9NO3 伊紅Y 25g
6-Amino-1-methyluracil
中文名： 分子式：C5H7N3O2 EosinY,Salt 10x25g
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào)；
3）客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative
real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi)，探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
