產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BK-P63220 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱(chēng) |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
病毒N5亞型PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法) |
50T |
BK-P63220 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專(zhuān)用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(lèi)(MHCⅠ/HLAⅠ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 2-Methylanthraquinone 中文名:2-甲基蒽醌 分子式:C15H10O2
人軸突生長(zhǎng)誘向因子4elisa試劑盒 人軸突生長(zhǎng)誘向因子4試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人軸突生長(zhǎng)誘向因子4試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人軸突生長(zhǎng)誘向因子4試劑盒、人軸突生長(zhǎng)誘向因子4 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 2-Methyl-4-(2-methylbenzoylamino)benzoic acid 中文名: 分子式:C16H15NO3 度:98.0%
人軸突生長(zhǎng)誘向因子4(n4)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human n4 (Nein 4) ELISA Kit 2-Methoxystypandrone 中文名: 分子式:C14H12O5
人軸突生長(zhǎng)誘向因子1elisa試劑盒 人軸突生長(zhǎng)誘向因子1試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人軸突生長(zhǎng)誘向因子1試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人軸突生長(zhǎng)誘向因子1試劑盒、人軸突生長(zhǎng)誘向因子1 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 2-Methyl-4-(2-methylbenzoylamino)benzoic acid 中文名: 分子式:C16H15NO3
人軸突生長(zhǎng)誘向因子1(n1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human n1 (Nein 1) ELISA
Kit 2-Methoxystypandrone 中文名: 分子式:C14H12O5 度:98.0%
TGM3 Others Human TGM3 / ansglutaminase 3 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 右旋糖苷/葡聚糖D40Dextran D40質(zhì)量規(guī)格:Mw35 000 to 45 000
;HFL1葡聚糖D20/右旋糖苷Dextran D20質(zhì)量規(guī)格:MW:16000~24000
CRFK細(xì)胞,貓腎細(xì)胞 結(jié)細(xì)胞,LOVE1細(xì)胞 CM-H069膀胱平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL (R)-(-)-2,2,2-三氟-1-(9-蒽基)乙醇(>99.0%(GC)) (R)-(-)-2,2,2-Trifluoro-1-(9-anthryl)ethanol質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)
大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞;RIN-m5F(S)-(+)-2,2,2-三氟-1-(9-蒽基)乙醇(>99.0%(GC))(S)-(+)-2,2,2-Trifluoro-1-(9-anthryl)ethanol 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)
RSV-G Others Respiratory syncytial virus/RSV
類(lèi)合胞病毒 hRSV (A, rsb1734) glycoprotein G / RSV-G 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) N-(2-羧基苯甲酰)-(-)-10,2-樟腦磺內(nèi)酰胺(>98.0%(HPLC)(T))N-(2-Carboxybenzoyl)-(-)-10,2-camphorsultam質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)
5E Others Rat 大鼠 CD73 / 5E 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 毛萼乙素Eriocalyxin B質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17知母皂苷元Sarsasapogenin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
A498細(xì)胞,細(xì)胞系 蝙蝠肺細(xì)胞,Tb 1 Lu細(xì)胞 CL-0430RS1(大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞)5×106cells/瓶×24'-去甲鬼臼4'-Demethylpodophyllotoxin質(zhì)量規(guī)格:標(biāo)準(zhǔn)品,用于含量測(cè)定
EA.hy926(臍細(xì)胞融合細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2杠柳毒苷Periplocin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
hMoCD14+-PB-c single donorpre-screened 外周血來(lái)源的類(lèi)CD14+單核細(xì)胞,單一來(lái)源,預(yù)選型 10 million 結(jié)膜成纖維細(xì)胞HConF1,2-二亞油酰甘油1,2-Dilinoleoylglycerol 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口原裝
病毒N5亞型PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)Duloxetine 136434-34-9
中文名:鹽酸度洛西汀 分子式:C18H20ClNOS 土壤無(wú)機(jī)0(S-PHOS)含量測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣
Ritonavir 155213-67-5 中文名:利托那韋 分子式:C37H48N6O5S2 土壤脫氫酶(SDHA)測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣
3-O-Acetylandrostenone hydrazone 122914-94-7 中文名:3-O-乙酰基雄酮腙 分子式:C21H32N2O2 土壤纖維素酶(S-CL)試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣
病毒N5亞型PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)Androstenone hydrazone 63015-10-1 中文名:雄酮腙 分子式:C19H30N2O 土壤酸性0酸酶(S-ACP)試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣
3,3-Dimethoxy-5α-androstan-17-one
3591-19-3 中文名:3,3-二甲氧基-5α-雄烷-17-酮 分子式:C21H34O3 土壤中性0酸酶(S-NP)試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào);
3)客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative
real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi),探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR