產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P63828 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
PCR檢測試劑盒(PCR 熔解曲線法) |
50T |
BK-P63828 |
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative
real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
小鼠膠原酶IIelisa試劑盒 小鼠膠原酶II試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠膠原酶II試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠膠原酶II試劑盒、小鼠膠原酶IIeisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 Desglucohellebrin 20300-44-1 中文名: 分子式:C30H42O10 度:98.0% 關鍵詞: 強心; 強心苷; 甾苷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫
小鼠膠原酶II(CollagenaseII)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Drevogenin A 10163-83-4 中文名: 分子式:C28H42O7
小鼠膠原酶II(CollagenaseII)ELISAKit ELISA. 96T/48T Falcarinol 21852-80-2 中文名: 分子式:C17H24O 度:% 關鍵詞:
小鼠膠原酶Ielisa試劑盒 小鼠膠原酶I試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠膠原酶I試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠膠原酶I試劑盒、小鼠膠原酶Ieisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 Desglucohellebrin 中文名: 分子式:C30H42O10
小鼠膠原酶I(CollagenaseI)ELISAKit ELISA.
96T/48T
Falcarinol 21852-80-2 中文名: 分子式:C17H24O
AXL Others Human
Axl Kinase 細胞裂解液 (陽性對照) 9-(2-羥乙基)腺嘌呤9-(2-Hydroxyethyl)adenine質量規(guī)格:美國進口
臍動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)E-64d,蛋白酶抑制劑,阿洛司他丁E64d,E-64d質量規(guī)格:>98%,BR
EFNA1 Others Rat 大鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 細胞裂解液 (陽性對照) 2’-脫氧胞苷-5‘-1酸二鈉鹽dCMP,2Na質量規(guī)格:>98%,BR
大鼠輸尿管上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mLdAMP;2’-脫氧腺苷-5‘-單1酸2'-Deoxyadenosine 5'-monophosphate質量規(guī)格:>99%,BR
OKT 11雜交瘤細胞抗CD2 OKT 11
hybridoma cells against CD2 IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+20%FBS黃素腺嘌呤二核苷酸二鈉鹽FAD-Na2質量規(guī)格:BR,羅氏進分
OK(負鼠腎小管細胞) 5×106cells/瓶×2
AMBP / Alpha 1 microglobulin 細胞裂解液 (陽性對照) 十一酸(Standard for GC,≥99.0%(GC))Undecanoic acid質量規(guī)格:Standard for
GC,≥99.0%(GC)
小鼠漿細胞瘤;MPC-11甲基壬基甲酮(Standard for GC,≥99.5%(GC))2-Undecanone質量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5%(GC)
EPHB3 Others Human EphB3 / HEK2 (aa 585-998) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六1酸甲酯(標準品)cis-4,7,10,13,16,19-Docosahexaenoic acid methyl ester質量規(guī)格:分析標準品
Hela, 細胞系順式-5,8,11,14,17-二十碳五1酸(標準品)cis-5,8,11,14,17-Eicosapentaenoic acid質量規(guī)格:分析標準品
CSC, 小鼠心肌細胞 小腸頸部表皮樣癌細胞,Ca
Ski細胞 F81(貓腎細胞)Celite 硅藻土 545(助濾劑,碳酸鈉處理,通量煅燒)Celite 545質量規(guī)格:助濾劑,碳酸鈉處理,通量煅燒
Clotrimazole
23593-75-1 中文名:克霉唑 分子式:C22H17ClN2 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠葡萄糖激酶(GCK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Clorofene 120-32-1 中文名:4-氯-2-芐基苯酚 分子式:C13H11ClO 度:98.0% 小鼠破骨細胞分化因子(ODF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Clopidogrel bisulfate 135046-48-9 中文名:硫酸氫氯吡格雷 分子式:C16H18ClNO6S2 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠皮質/上腺(CO)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Clevidipine butyrate 167221-71-8 中文名:丁酸氯維地平 分子式:C21H23Cl2NO6 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠破骨細胞分化因子(ODF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
PCR檢測試劑盒(PCR 熔解曲線法)Clerosterol glucoside 123621-00-1 中文名:赤桐甾醇葡萄糖苷 分子式:C35H58O6 度:93.0% 關鍵詞: 豆甾烷; 甾苷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫 小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISAkit ELISA. 96T/48T