產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P63325 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
A組乙型溶血性鏈球菌PCR檢測試劑盒(熒光PCR法) |
50T |
BK-P63325 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
兔結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISAKit ELISA. 96T/48T 5,6-Dihydro-6-methyl-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-one 中文名: 分子式:C8H8OS2 度:98.0%
兔結(jié)締組織生長因子(rabbit CTGF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate 239463-72-0 中文名: 分子式:C22H25N3O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5-(1-Piperazinyl)benzofuran-2-carboxamide 183288-46-2 中文名: 分子式:C13H15N3O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔交聯(lián)物(PY)ELISAKit ELISA. 96T/48T 4-Chloro-6-iodoquinazoline 98556-31-1 中文名: 分子式:C8H4ClIN2
兔交聯(lián)物(PY)ELISAKit ELISA.
96T/48T
4-Bromomethyl-2-cyanobiphenyl 中文名: 分子式:C14H10BrN 度:98.0%
FLT1 Others Rat 大鼠 VEGFR1 / FLT-1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (1RS)-1-(6-甲氧-2-萘基)乙醇(萘普生雜質(zhì)K)(1RS)-1-(6-Methoxy-2-naphthyl)ethanol
(Naproxen Impurity K)質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
胎盤羊膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)6'-甲氧基-2'-萘乙酮 (萘普生雜質(zhì) L)6'-Methoxy-2'-acetonaphthone (Naproxen Impurity L)質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
Jurkat D,E細(xì)胞,T瘤轉(zhuǎn)基因細(xì)胞 615小鼠株,Ca759細(xì)胞 多聚賴氨酸10 mg/mlPLL(S)-普拉克索二鹽酸化物(S)-Pramipexole Di質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
NCI-H295R(腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2(R)-普拉克索二鹽酸化物(R)-Pramipexole Di質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
C127(小鼠癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M124小鼠脈絡(luò)膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL 腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]N-去甲基長春花堿N-Desmethyl Vinblastine質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
CD48 Others Rat 大鼠 CD48 / SLAMF2 / BCM1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 米氮平Mirtazapine質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
兔*間質(zhì)干細(xì)胞 Rabbit bone marrow mesenchymal stem cells米氮平(標(biāo)準(zhǔn)品)Mirtazapine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
SF-295細(xì)胞,XG惡性細(xì)胞 毛霉 腸平滑肌細(xì)胞RNAHISMC miRNA5 μg5-氟乳清酸;5-FOA5-Fluoroorotic acid,5-FOA質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
SF126(細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2枸櫞酸莫沙比利(標(biāo)準(zhǔn)品)Mosapride 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品用于含量測定
HCC827(非小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0385MFC-GFP(小鼠前細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記))5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1枸櫞酸莫沙比利Mosapride 質(zhì)量規(guī)格:≥98.5%,BR,二水合物
1,6-Dioxaspiro[4.5]decan-2-methanol 中文名: 分子式:C9H16O3 度:98.0% 兔子端粒酶(TE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
(S,E)-Deca-2,9-diene-4,6-diyne-1,8-diol 中文名: 分子式:C10H10O2 度:% 兔子凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
A組乙型溶血性鏈球菌PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)D-arabinitol 中文名: 分子式:C5H12O5 度:% 兔子凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
3-(Hydroxymethyl)cyclopentanone 中文名: 分子式:C6H10O2 度:% 兔子膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
12-Hydroxyjasmonic acid 中文名:12-羥基酸 分子式:C12H18O4 度:95.5% 兔子單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。