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實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Methyl 1-[(2'-cyanobiphenyl-4-yl)methyl]-2-ethoxy-1H-benzimidazole-7-carboxylate  139481-44-0  中文名：  分子式：C25H21N3O3 

小鼠二0酸腺苷(ADP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Dabigatran etexilate  211915-06-9  中文名：  分子式：C34H41N7O5 

小鼠二(MDA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Gracillin  中文名：纖細(xì)薯蕷皂苷  分子式：C45H72O17 

小鼠兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           D(-)-Arginine  中文名：D-精氨酸  分子式：C6H14N4O2 

小鼠多效生長(zhǎng)因子   英文名稱：   Pleioophin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   PTN  Gemcitabine  95058-81-4  中文名：吉西他濱  分子式：C9H11F2N3O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：
RA, 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞L-谷氨酸L-Glutamic acid質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

3T3/e細(xì)胞，小鼠成纖維細(xì)胞 白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞,JEG-3/VP16-IL-2細(xì)胞 腎系膜細(xì)胞RNAHRMC miRNA5 μgL-延胡索乙素L-Tetrahydropalmatine質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

恒河猴肺細(xì)胞;RM-L1尼可地爾-d4Nicorandil-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

EPHB4 Others Human  EphB4 / HTK 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 尼可地爾N-氧化物Nicorandil N-Oxide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;CGM16-羥基尼可地爾6-Hydroxy Nicorandil質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
JEC, 內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系參二醇(標(biāo)準(zhǔn)品)Panaxadiol質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞 小鼠*癌beta細(xì)胞，Beta-TC-6細(xì)胞 EB (NBL-4)(牛胚氣管細(xì)胞)參三醇(標(biāo)準(zhǔn)品)Panaxatriol質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

紅系細(xì)胞;TF-1參皂苷CK(標(biāo)準(zhǔn)品)Compound K質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97%，標(biāo)準(zhǔn)品

HAVCR1 Others Canine 狗 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 參皂苷F1(標(biāo)準(zhǔn)品)Ginsenoside F1質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]參皂苷F2(標(biāo)準(zhǔn)品)Ginsenoside F2質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
4-Amino-3-hydroxybenzoic acid  2374-03-0  中文名：4-氨基-3-羥基苯甲酸  分子式：C7H7NO3  度：98.0%      小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白-3α   英文名稱：   Macrophage Inflammatory protein 3α   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   MIP-3α

4-Amino-3-hydroxy-1-naphthalenesulfonic acid  116-63-2  中文名：4-氨基-3-羥基-1-萘磺酸  分子式：C10H9NO4S  度：98.0%      小鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

4-Amino-3,5-dichloropyridine  22889-78-7  中文名：  分子式：C5H4Cl2N2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

4-Amino-2,5-dimethoxy-N-phenylbenzenesulphonamide  52298-44-9  中文名：4-氨基-2,5-二甲氧基-N-苯基苯磺酰胺  分子式：C14H16N2O4S  度：99.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

對(duì)蝦病毒（IMNV）PCR檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法）4-Allyloxy-2-hydroxybenzophenone  2549-87-3  中文名：4-丙烯氧基-2-羥基二苯甲酮  分子式：C16H14O3  度：99.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝