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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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??刹《?11 型PCR檢測(cè)試劑盒 (熒光PCR法)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):BK-P63403
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-26
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 帛科
貨號(hào) BK-P63403
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)%
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

貨號(hào)

??刹《?span> 11 PCR檢測(cè)試劑盒 (熒光PCR法)

50T

BK-P63403

實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA
沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2
、血液樣品:用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2.
標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專(zhuān)用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
??刹《?nbsp;11 型PCR檢測(cè)試劑盒 (熒光PCR法)6.
換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1αelisa試劑盒   兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α試劑盒、兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。  7α-Hydroxysitosterol  34427-61-7  中文名:7α-羥基谷甾醇  分子式:C29H50O2  度:95.0%  關(guān)鍵詞:  甘蔗; 菠蘿; 豆甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  (S)-4-(4-Aminobenzyl)-2(1H)-oxazolidinone  152305-23-2  中文名:(s)-4-(4-氨基芐基)-1,3-噁唑烷-2-  分子式:C10H12N2O2  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

兔子膠原酶II(CollagenaseII)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  7-Oxo-β-sitosterol  2034-74-4  中文名:7-氧代-β-谷甾醇  分子式:C29H48O2  度:98.0%  關(guān)鍵詞:  ; 松屬; 豆甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

兔子膠原酶II(CollagenaseII)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  7α-Hydroxystigmasterol  中文名:7α-羥基豆甾醇  分子式:C29H48O2  度:%

兔子膠原酶II(Collagenase II)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  (S)-(-)-2-Amino-3-methyl-1,1-diphenyl-1-butanol  中文名:(S)-(-)-2-氨基-3-甲基-1,1-二苯基-1-丁醇  分子式:C17H21NO  度:99.0%
胚肺二倍體細(xì)胞;HEL-2萊苞迪甙C(標(biāo)準(zhǔn)品)Rebaudioside C質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠*瘤細(xì)胞;IR983F 腺癌細(xì)胞,Caco-2細(xì)胞 WEHI 164細(xì)胞,鼠纖維細(xì)胞系D-(-)-扁桃酸;R-扁桃酸(R)-(?)-Mandelic acid質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

GBC-SD, 細(xì)胞 Human1-氨基海因鹽酸鹽;AHD,1-氨基乙內(nèi)酰脲鹽酸鹽1-Aminohydantoin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

CD99L2 Others Mouse 小鼠 CD99L2 / MIC2L1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1-氨基海因鹽酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)1-Aminohydantoin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

尿道上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)促腎上腺皮質(zhì)激素(1-24),替可克肽ACTH (1-24), human質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
CNE-1 高分化細(xì)胞參皂苷Rb1(標(biāo)準(zhǔn)品)Ginsenoside Rb1質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

P9-EGFP-puro小鼠*基質(zhì)細(xì)胞 P9-EGFP-puro mouse bone marrow somal cells 1640+10%FBS+1%P/S參皂苷Rb2(標(biāo)準(zhǔn)品)Ginsenoside Rb2質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

CD40LG Protein Canine 重組狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)參皂苷Rb3(標(biāo)準(zhǔn)品)Ginsenoside Rb3質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

心肌細(xì)胞 (HCMa) (1×106 ) RGC-5, 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞 Mouse參皂苷Rc(標(biāo)準(zhǔn)品)Ginsenoside Rc質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠T細(xì)胞瘤細(xì)胞;Cyc-Tag(S49)參皂苷Rd(標(biāo)準(zhǔn)品)Ginsenoside Rd質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品
3-Aminoadamantan-1-ol  中文名:  分子式:C10H17NO  度:98.0%  DeoxycholicAcid,Salt   50g

Raltegravir  中文名:雷特格韋  分子式:C20H21FN6O5  度:98.0%  焦碳酸二乙脂   10ml

Vildagliptin  中文名:維達(dá)列汀  分子式:C17H25N3O2  度:98.0%  DEPC   100ml              

1-(2-Chloroacetyl)pyrrolidine-2-carbonitrile  中文名:  分子式:C7H9ClN2O  度:98.0%  豚鼠組胺elisa試劑盒   豚鼠組胺試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   豚鼠組胺試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豚鼠組胺試劑盒、豚鼠組胺eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。

Loratadine  中文名:氯雷他定  分子式:C22H23ClN2O2  度:98.0%  豚鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1elisa試劑盒   豚鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   豚鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豚鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1試劑盒、豚鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1
RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2
)客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào);
3
)客戶(hù)盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi),探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

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