產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P63269 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
甲型病毒/病毒H7亞型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法) |
50T |
BK-P63269 |
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
髓過氧化物酶(MPO)測定試劑盒 Ranolazine 中文名:雷諾嗪 分子式:C24H33N3O4
酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣 Withanolide S 63139-16-2 中文名:醉茄內(nèi)酯S 分子式:C28H40O8 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 南非醉茄; 睡茄交酯; 睡茄內(nèi)酯; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
酸性酯酶染液 Eosinstain 4,4'-Diaminodiphenylsulfone 80-08-0 中文名:4,4'-二氨基二苯砜 分子式:C12H12N2O2S 度:98.0%
酸性品紅(復(fù)紅) 5g 4,4'-Cyclohexylidenebisphenol 843-55-0 中文名:4,4'-環(huán)亞己基雙苯酚 分子式:C18H20O2 度:98.0%
酸性木聚糖酶測試盒 可見分光光度法 50管/24樣 Testosterone enanthate 中文名:庚酸 分子式:C26H40O3
Walker氏癌256瘤株;W256 細胞,U251細胞 WEHI 231細胞,小鼠B細胞TCPP[=四(4-羧苯基)卟吩](>97.0%(HPLC)(T))TCPP
[=Tetrakis(4-carboxyphenyl)porphyrin] 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)(T)
5637, 細胞 Human偶氮甲堿H(>97.0%(T))Azomethine H 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)
CD180 Others Mouse 小鼠 CD180 / RP105 細胞裂解液 (陽性對照) 5-磺基水楊酸sulfosalicyclic acid質(zhì)量規(guī)格:AR
角質(zhì)細胞培養(yǎng)基(特定)KM-d1-氨基-2-萘酚-4-磺酸1-Amino-2-naphthol-4-sulfonic Acid 質(zhì)量規(guī)格:AR
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素HA1
(Hemagglutinin) 細胞裂解液 (陽性對照) 利卡西平;10,11-二氫-10-羥基卡馬西平10,11-Dihydro-10-hydroxy
Carbamazepine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,美國進口原裝
C127細胞,細胞 細胞,9811C11細胞 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-1西替利嗪Cetirizine 2HCl質(zhì)量規(guī)格:>98%,進口分裝
大鼠源細胞醋酸西曲瑞克Cetrorelix Acetate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
KLK11 Others Human KLK11 / Kallikrein-11 細胞裂解液 (陽性對照) 白屈菜紅堿Chelerythrine質(zhì)量規(guī)格:>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品
胎盤滋養(yǎng)層細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)醋酸氯己定Chlorhexidine Acatate質(zhì)量規(guī)格:>98%
CD320 Others Mouse 小鼠 CD320 / 8D6A 細胞裂解液 (陽性對照) 氟伐他汀鈉Fluvastatin salt質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
rsodeoxycholic acid 中文名:熊去氧膽酸 分子式:C24H40O4 度:98.0% 兔銅藍蛋白(CP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Deoxycholic acid 中文名:去氧膽酸 分子式:C24H40O4 度:98.5% 兔細胞間粘附分子-1 (rabbit ICAM-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
甲型病毒/病毒H7亞型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)Timosaponin AIII 中文名:知母皂苷AIII 分子式:C39H64O13 度:98.5% 兔干擾素-a(rabbit IFN-a) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Diosgenin 中文名:薯蕷皂苷元 分子式:C27H42O3 度:98.0% 兔干擾素-β(rabbit IFN-β) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Sarsasapogenin 中文名:菝葜皂苷元 分子式:C27H44O3 度:99.0% 兔干擾素-r(rabbit IFN-r) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。