產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4460 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
蒼白密螺旋體螺旋體PCR檢測試劑盒價格 | Treponema pallidum()PCR | BKP4460 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:蒼白密螺旋體螺旋體PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Atorvastatin calcium 134523-03-8 中文名:阿托伐他汀鈣 分子式:C33H35FN2O5 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Aspirin 50-78-2 中文名:阿司匹林 分子式:C9H8O4 度:99.0% 小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Aspergillon A 2239299-08-0 中文名: 分子式:C22H32O 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠0脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Aspartame 22839-47-0 中文名:阿司帕坦 分子式:C14H18N2O5 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠0酸葡萄糖變位酶(PGM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Artesunate 88495-63-0 中文名:青蒿琥酯 分子式:C19H28O8 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
兔子組織因子(TF)ELISAKit ELISA. 96T/48T Abiraterone acetate 154229-18-2 中文名:乙酸阿比特龍酯 分子式:C26H33NO2
兔子組織因子(TF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 2,2-Bis(hydroxymethyl)butyric acid 10097-02-6 中文名:2,2-二羥甲基丁酸 分子式:C6H12O4 度:98.0%
兔子組織型纖溶酶原激活劑elisa試劑盒 兔子組織型纖溶酶原激活劑試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子組織型纖溶酶原激活劑試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔子組織型纖溶酶原激活劑試劑盒、兔子組織型纖溶酶原激活劑eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Adenosine 5'-monophosphate 中文名:5'-腺嘌呤核苷酸 分子式:C10H14N5O7P
兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Allopurinol 中文名:別嘌醇 分子式:C5H4N4O 度:98.0%
兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISAKit ELISA. 96T/48T Nandrolone decanoate 360-70-3 中文名:癸酸諾龍 分子式:C28H44O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
蒼白密螺旋體螺旋體PCR檢測試劑盒價格IL18 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL-18 / IL-1F4 蛋白 (His 標(biāo)簽)聚乙二醇6000質(zhì)量規(guī)格:分子量5,000~7,000,分子生物學(xué)級PEG 6000
NCTC 1469(小鼠正常肝細胞) 5×106cells/瓶×2 WEHI 22.1(B細胞)吐溫20質(zhì)量規(guī)格:CPTween 20
CL-0305SF-295(人XG惡性細胞)5×106cells/瓶×2曲拉通X-100質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級Triton X-100
PDGFRB Others Rat 大鼠 PDGFRB / PDGFR-1 人細胞裂解液 (陽性對照) D-葡萄糖醛酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,進分D-Glucuronic acid
人脈絡(luò)叢內(nèi)皮細胞總RNAHCPEC NAL-別蘇氨酸質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRL(+)-allo-Threonine
人晶狀體上皮細胞 (HLEpiC)( 5×105 ) HUVEC-12, 人臍內(nèi)皮細胞系 Human13-乙基-17-羥基-18,19-dinor-17α-pregn-5(10)-en-20-yn-3-one(左炔諾孕酮雜質(zhì)B)質(zhì)量規(guī)格:美國進口13-Ethyl-17-hydroxy-18,19-dinor-17α-pregn-5(10)-en-20-yn-3-one(Levonorgestrel Impurity B)
人細胞;C-33A17-去乙酰基諾孕酯質(zhì)量規(guī)格:美國進口17-Desacetyl Norgestimate
人表皮色素細胞-深色素(HEM)( 5×105 )左西孟坦質(zhì)量規(guī)格:美國進口Levosimendan
rCF, 大鼠成纖維細胞利奈唑酮-d3質(zhì)量規(guī)格:美國進口Linezolid-d3
人T瘤轉(zhuǎn)基因細胞;Jurkat D,E 大鼠腎小管平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL12-O-Tiglylphorbol-13 –isobutyrate質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品12-O-Tiglylphorbol-13 –isobutyrate
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。