產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4419 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
豬病毒型PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Suid Herpesvirus1( SuHV1) I PCR | BKP4419 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
Alogliptin benzoate 850649-62-6 中文名:阿格列汀苯甲酸鹽 分子式:C25H27N5O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Alogliptin 850649-61-5 中文名:阿格列汀 分子式:C18H21N5O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Aloe-emodin 481-72-1 中文名:蘆薈大黃素 分子式:C15H10O5 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)Elisa試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Allylestrenol 432-60-0 中文名:烯丙雌醇 分子式:C21H32O 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)Elisa試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Allyl phenoxyacetate 7493-74-5 中文名:苯氧乙酸烯丙酯 分子式:C11H12O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠可溶性細(xì)胞間粘附分子-1 英文名稱: Soluble Iercellular Adhesion Molecule-1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: sICAM-1
兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 8-Azaguanine 中文名:8-氮雜鳥嘌呤 分子式:C4H4N6O
兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISAKit ELISA. 96T/48T 8-Bromo-7-(but-2-yn-1-yl)-3-methyl-1H-purine-2,6(3H,7H)-dione 中文名: 分子式:C10H9BrN4O2 度:98.0%
兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 1-(4-(3-Chloropropoxy)-3-methoxyphenyl)ethanone 58113-30-7 中文名: 分子式:C12H15ClO3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔子可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 1-(2-Amino-5-chlorophenyl)-1-(trifluoromethyl)-3-cyclopropyl-2-propyn-1-ol 中文名: 分子式:C13H11ClF3NO 度:98.0%
兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione 1265908-20-0 中文名: 分子式:C28H40O3 度:% 關(guān)鍵詞: ; 麥角甾烷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
豬病毒型PCR檢測試劑盒供應(yīng)LAMP3 Others Cynomolgus 食蟹猴 LAMP3 / DC-LAMP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 吡哌酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Pipemidic acid質(zhì)量規(guī)格:供檢查用
豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL3鹽酸氟奮乃靜(標(biāo)準(zhǔn)品)FLUPHENAZINE HYDROCHLORIDE質(zhì)量規(guī)格:供HPLC法含量測定用
SPC-A1細(xì)胞,人 綠猴腎細(xì)胞,Vero細(xì)胞 CM-M034小鼠肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL鴉膽子苦醇(標(biāo)準(zhǔn)品)(+)-Brusatol質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Sf-9(昆蟲細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸哌唑嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)Prazosin HCl質(zhì)量規(guī)格:含量測定
NHEK.f-c 正常人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞(NHEK)少年,單一來源 500,000cells 原代神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml7-羥基7-Hydroxycoumarin質(zhì)量規(guī)格:≥97%,BR
16HBE細(xì)胞,人上皮細(xì)胞 化學(xué)轉(zhuǎn)化小鼠鼻咽上皮細(xì)胞,TMNE細(xì)胞 CL-0178OVCAR-3(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2酸鉀shēng huà shì jì容量:1克
U-87 MG(人神經(jīng)細(xì)胞) 5×106cells/瓶×22,3-二基丁烷 標(biāo)準(zhǔn)品 2,3-DIMqTHYLBUTcNq 1979/9/8
HVMF-c 人類絨毛間質(zhì)成纖維細(xì)胞(HVMF) 500,000cells 腎系膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)碳酸銅shēng huà shì jì容量:RT5克
成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)dNTPMIX100mMSOLUTIONpH7.0dNTP混合溶液,100 mM , pH 7.0超級40 M897
PRELP Others Human 人 PRELP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5680-80-8L-絲酸鹽酸鹽L-Serine metxyl ester xy7nochloride
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:豬病毒型PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。