產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4377 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
馬胃葡萄球菌PCR檢測試劑盒直銷 | Staphylococcus equorumPCR | BKP4377 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:馬胃葡萄球菌PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
7-Oxo-β-sitosterol 2034-74-4 中文名:7-氧代-β-谷甾醇 分子式:C29H48O2 Rat vascular endothelial cell growth factor receptor 2 (VEGFR-2) ELISA Kit 大鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR-2)ELISA試劑盒
Schleicheol 2 256445-68-8 中文名: 分子式:C30H52O2 Humansalivaryductaoaibody,SDAELISAKit 人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Ikshusterol 3-O-glucoside 112137-81-2 中文名: 分子式:C35H60O7 Humancytokeratin18,CK-18ELISA試劑盒人細(xì)胞角蛋白18(CK-18)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Cerevisterol 516-37-0 中文名:啤酒甾醇 分子式:C28H46O3 組織HPV7(HUMANPAPILLOMAVIRUS-7)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒20次
3β,5α-Dihydroxyergosta-7,22-dien-6-one 14858-07-2 中文名: 分子式:C28H44O3 Humanplatelet-associatedCompleme3,PAC3ELISAKit人血小板相關(guān)補(bǔ)體3(PAC3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔生成素2elisa試劑盒 兔生成素2試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔生成素2試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔生成素2試劑盒、兔生成素2 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 5-Chloro-2-nitrobenzoic acid 2516-95-2 中文名: 分子式:C7H4ClNO4 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5-Benzyloxyindole 1215-59-4 中文名:5-芐氧基吲哚 分子式:C15H13NO 度:98.0%
兔生成素2(ANG-2)ELISAKit ELISA. 96T/48T 5α-Androstane-3β,17β-diol 571-20-0 中文名:5α-雄烷二醇 分子式:C19H32O2
兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1elisa試劑盒 兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1試劑盒、兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 5-Chloro-2-nitrobenzoic acid 2516-95-2 中文名: 分子式:C7H4ClNO4
兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5-Benzyloxyindole 1215-59-4 中文名:5-芐氧基吲哚 分子式:C15H13NO
馬胃葡萄球菌PCR檢測試劑盒直銷MET Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 舒林酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:檢查Sulindac
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-E2HSP990質(zhì)量規(guī)格:>98%,Hsp90抑制劑NVP-HSP990
中國倉鼠肺細(xì)胞;R 1610 [R1610] 口腔表皮樣癌細(xì)胞,KB細(xì)胞 CIK細(xì)胞,草魚細(xì)胞鹽酸妥拉唑林(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Tolazoline HCl
人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞;HFSF鹽酸硫利達(dá)嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:鑒別Thioridazine hydrochloride
HA Others H13N8 甲型 H13N8 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 慶大霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測定Gentamicin
3T3TK細(xì)胞,小鼠成纖維細(xì)胞 TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞,JEG-3-VP16-TNFa細(xì)胞 人滑膜細(xì)胞RNAHS miRNA5 μgTHIOUREA蛋白組學(xué)級500G62-56-6RT
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-1(±)新煙減 (-)-cNcBcSINq 13078-04-1
EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-本炳安醇 L-Phqnylglycinol 318-92-4
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;Caco-2L-天冬酸5克RT
USP46 Others Human 人 USP46 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-芴甲氧羰?;?/span>-L-蛋酸NA