產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4425 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線(xiàn)放線(xiàn)桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
塔卡里伯病毒PCR檢測(cè)試劑盒直銷(xiāo) | Tacaribe Virus(TCRV)RTPCR | BKP4425 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:塔卡里伯病毒PCR檢測(cè)試劑盒直銷(xiāo)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Aminophenazone 中文名: 分子式:C13H17N3O 脂褐質(zhì)(不包括比色)檢測(cè) Free fatty acids (NEFA) detection
Ambroxol 中文名:鹽酸氨溴索 分子式:C13H19Br2ClN2O 組織因子 英文名稱(chēng): tissue factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): TF
Ambrisentan 中文名:安倍生坦 分子式:C22H22N2O4 組織因子抑制物 英文名稱(chēng): tissue factor protein inhibitor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): TFPⅠ
Altrenogest 中文名:烯丙孕素 分子式:C21H26O2 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子-α 英文名稱(chēng): Ttansforming Growth Factor α 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): TGF-α
alpha-Terthienylmethanol 中文名: 分子式:C13H10OS3 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子-β1 英文名稱(chēng): Ttansforming Growth Factor β1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): TGF-β1
兔子球蛋白M(IgM)ELISAKit ELISA. 96T/48T 7-Methoxy-1-tetralinone 6836-19-7 中文名: 分子式:C11H12O2
兔子球蛋白M(IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 1,3-Bis(4-aminophenoxy)benzene 2479-46-1 中文名:1,3-雙(4-氨苯氧基)苯 分子式:C18H16N2O2 度:98.0%
兔子球蛋白Gelisa試劑盒 兔子球蛋白G試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子球蛋白G試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子球蛋白G試劑盒、兔子球蛋白G elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 8-Hydroxyodoroside A 176519-75-8 中文名: 分子式:C30H46O8 度:96.0% 關(guān)鍵詞: 夾竹桃; 強(qiáng)心苷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
兔子球蛋白Gelisa試劑盒 兔子球蛋白G試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子球蛋白G試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子球蛋白G試劑盒、兔子球蛋白G elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 8-Hydroxyhyperforin 8,1-hemiacetal 59014-02-7 中文名: 分子式:C35H52O5 度:% 關(guān)鍵詞: 貫葉連翹; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
兔子球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 8-Phenyloctanoic acid 26547-51-3 中文名:8-苯基辛酸 分子式:C14H20O2
塔卡里伯病毒PCR檢測(cè)試劑盒直銷(xiāo)Ke-3 人細(xì)胞外消旋馬來(lái)酸噻嗎洛爾質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口rac Timolol Maleate
MDA-MB-436人腺癌細(xì)胞 MDA-MB-436 human breast adenocarcinoma cells L-15培養(yǎng)基+10%FBS(R)-(+)-馬來(lái)酸噻嗎洛爾質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口(R)-(+)-Timolol Maleate
FAM3C Protein Human 重組人 FAM3C / ILEI 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(S)-(-)-馬來(lái)酸噻嗎洛爾質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口(S)-(-)-Timolol Maleate
小鼠雪旺細(xì)胞(MSC)(5×105) MDA-MB-231, 人癌細(xì)胞 Human替硝唑標(biāo)記d4質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Tinidazole Labeled d4
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1外消旋α-羥基布洛芬質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口rac α-Hydroxy Ibuprofen
大鼠癌細(xì)胞;SHZ-889-芴甲基-N-琥珀酰亞基碳酸酯,英文名或英文縮寫(xiě):FMOC-OSU,級(jí)別:BR,99%,規(guī)格:10克
BMPR2 Others Human 人 BMPR-II 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) α-L-巖藻糖苷酶 α-L-Fucosidase (1.8u/mg) 9037-65-4 1U 通用試劑
人膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞總RNAHBdSF NA加醋-D FORMIC cCID C-D 917-71-2
ATF2 Others Human 人 ATF2 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Chloroauricacidhydrated四水合錄金酸5毫克基準(zhǔn)試劑,99.95%
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO Hu 164 SCF 17(L-絲酸)
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。