產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4371 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
葡萄狀穗霉屬通用PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Stachybotrys spp.PCR | BKP4371 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:葡萄狀穗霉屬通用PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
7-Acetoxy-4-methylcoumarin 中文名:7-乙酰氧基-4-甲基香豆素 分子式:C12H10O4 度:95.0% 小鼠α羥基脫氫酶(αHBDH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Adrenosterone 中文名:腎上腺甾酮 分子式:C19H24O3 度:99.0% 小鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
(1S,2R)-2-Amino-1,2-diphenylethanol 中文名:(1S,2R)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇 分子式:C14H15NO 度:98.0% 小鼠α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-Acetylbutyrolactone 中文名:2-乙酰基丁內(nèi)酯 分子式:C6H8O3 度:98.0% 小鼠α甘露糖苷酶(αManase)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-Amino-9H-fluoren-9-one 中文名:2-氨基-9H-芴-9-酮 分子式:C13H9NO 度:99.0% 小鼠α半乳糖基抗原elisa試劑盒 小鼠α半乳糖基抗原試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠α半乳糖基抗原試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠α半乳糖基抗原試劑盒、小鼠α半乳糖基抗原eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5-Benzyl L-glutamate 中文名:L-谷氨酸5-芐酯 分子式:C12H15NO4 度:98.0%
兔銅藍(lán)蛋白(CP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5-Benzyl L-glutamate 中文名:L-谷氨酸5-芐酯 分子式:C12H15NO4
兔A1celisa試劑盒 兔A1c試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔A1c試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔A1c試劑盒、兔A1c elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 5-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-glutamate 中文名:N-(叔丁氧羰基)-L-谷氨酸-5-芐酯 分子式:C17H23NO6 度:98.0%
兔A1c(A1c)ELISAKit ELISA. 96T/48T 4-Bromomethyl-2-cyanobiphenyl 中文名: 分子式:C14H10BrN
兔胎盤生長(zhǎng)因子elisa試劑盒 兔胎盤生長(zhǎng)因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔胎盤生長(zhǎng)因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔胎盤生長(zhǎng)因子試劑盒、兔胎盤生長(zhǎng)因子elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 5-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-glutamate 中文名:N-(叔丁氧羰基)-L-谷氨酸-5-芐酯 分子式:C17H23NO6
葡萄狀穗霉屬通用PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)MS4A1 Others Human 人 CD20 / MS4A1 (aa 213-297) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 4-(2-乙基)本磺酰錄shēng huà shì jì容量:RT100克
大鼠表皮色素細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL偏釩酸鈉 metavanadate dihydrate 16519-65-6 100G 通用試劑
LLC-MK2恒河猴腎細(xì)胞 Ganges RIver LLC-MK2 monkey kidney cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS愈創(chuàng)木膠;愈創(chuàng)木脂 GuM gucicci;GuM gucicc;Rqsin gucicc;Gucicc; 9000/9/7
IFNA4 Protein Human 重組人 IFNα4 / IFNa4 / Ierferon alpha-4 蛋白 (His 標(biāo)簽)L-Cysteinemetxylesterxy7nochlorideL-鹽酸半胱酸25克BR,99%
MDA-MB-175VII(人導(dǎo)管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 BRL 3A(大鼠肝細(xì)胞)1271-42-7二茂鐵Ferrocenecarboxylic acid
ACVR2B Others Mouse 小鼠 ACVR2B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) NEXTGEL12.5%SOLUTIONNEXT GEL 12.5%蛋白組學(xué)級(jí)透明無(wú)色液體RTsigma
皮膚肥大細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)3-安基-9-基咔坐;3-安基-9-基卡巴坐;3-安基-9-基氮雜芴 3-cMino-9-qthylccrbczolq;cqC 2013/3/1
EFNB1 Others Rat 大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) BIS-TRISBis-Tris超級(jí)白色結(jié)晶粉末RTsigma
大鼠腎管狀上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL1,5-Dixy7noxy1,5-奈二酚1毫克AR,10%
Y3-Ag 1.2.3大鼠細(xì)胞 Myeloma cells in Y3-Ag 1.2.3 rats DMEM培養(yǎng)基+10%FBS135-19-32-酚;β-酚;β-羥基;2-羥基2-Naphthol;β-xy7noxy;2-xy7noxy;Isonaphthol;2-Naphthalenol;C.I.37500
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。