產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4354 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
綿羊痘病毒PCR檢測試劑盒說明書 | Sheeppox Virus(SPPV)PCR | BKP4354 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:綿羊痘病毒PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數(shù)據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
6-Amino-1-methyluracil 2434-53-9 中文名: 分子式:C5H7N3O2 兔子轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Gimeracil 103766-25-2 中文名:吉莫斯特 分子式:C5H4ClNO2 Rat vascular endothelial cell growth factor receptor 1 (VEGFR-1) ELISA Kit 大鼠內皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1)ELISA試劑盒
Amlexanox ethyl ester 68301-99-5 中文名: 分子式:C18H18N2O4 HumanAi-keratinaibody,AKAELISAKit 人抗角蛋白抗體(AKA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
1,2-Cyclohexanedicarboximide 7506-66-3 中文名: 分子式:O2 Humancytokeratin13,CK-13ELISA試劑盒人細胞角蛋白13(CK-13)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Perospirone 129273-38-7 中文名:鹽酸哌羅匹隆 分子式:C23H31ClN4O2S 組織HPV6(HUMANPAPILLOMAVIRUS-6)病毒定量PCR擴增檢測試劑盒20次
兔堿性成纖維細胞生長因子 英文名稱: Rabbit Basic Fibroldast Growth Factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: BFGF 4β-Hydroxywithanolide E 54334-04-2 中文名:4β-羥基醉茄內酯E 分子式:C28H38O8 度:98.0% 關鍵詞: 蛻皮甾體拮抗劑; ; 酸漿屬; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫
兔堿性成纖維生長因子(rabbit b-FGF/FGF-2) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 5-[Bis(2-hydroxyethyl)amino]-1-methyl-1H-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester 中文名: 分子式:C18H27N3O4
兔堿性0酸酶(ALP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5-(4-((3-chloro-4-((3-fluorobenzyl)oxy)phenyl)amino)quinazolin-6-yl)furan-2-carbaldehyde 中文名: 分子式:C26H17ClFN3O3 度:98.0%
兔基質細胞衍化生長因子1a 英文名稱: Rabbit Somal cell Derived Factor 1a 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: SDF1a 4-Benzoyl 4'-methyldiphenyl sulfide 中文名:4-苯甲酰-4'-甲基二苯硫醚 分子式:C20H16OS 度:98.0%
兔基質金屬蛋白酶-9(rabbit MMP-9) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 4-O-(3-nitropropanoyl)corollin 中文名: 分子式:C18H24N4O18
綿羊痘病毒PCR檢測試劑盒說明書NCI-H716(人結直腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 3T3-L1(小鼠脂肪細胞)N'-Fmoc-L-賴氨酸質量規(guī)格:>98%Fmoc-Lys-OH
CL-0318B16-F1(小鼠色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2Fmoc-天門冬氨酸-β-芐酯質量規(guī)格:>98%Fmoc-L-aspartic acid β-benzyl ester
REG1B Others Cynomolgus 食蟹猴 REG1B / PSPS2 人細胞裂解液 (陽性對照) 芴甲氧羰基-L-天冬氨酸-1-叔丁酯質量規(guī)格:>98.5%,BRFmoc-Asp(OH)-OtBu
人真皮微內皮細胞總RNAHDMEC NAFmoc-L-賴氨酸鹽酸鹽質量規(guī)格:0.98Fmoc-Lys-OH·HCl
MDA-MB-435S細胞,人癌細胞 鼠成纖維細胞系,GR細胞 原代神經元細胞特制基礎無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/100ml氧化白藜蘆醇(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Oxyresveratrol
人纖維環(huán)細胞HAFC1-溴-4-壬基苯(>95.0%(GC))質量規(guī)格:>95.0%(GC)1-Bromo-4-nonylbenzene
FSTL1 Others Mouse 小鼠 FSTL1 人細胞裂解液 (陽性對照) 1-溴-4-戊苯(>90.0%(GC))質量規(guī)格:>90.0%(GC)1-Bromo-4-pentylbenzene
大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞;BOS-61-溴-4-己苯(>90.0%(GC))質量規(guī)格:>90.0%(GC)1-Bromo-4-hexylbenzene
大鼠細胞;UMR-106 ,LTEP-a-2細胞 MSCS細胞,猴的骨髓間充質干細胞1-溴-4-庚苯(含穩(wěn)定劑銅屑)(>95.0%(GC))質量規(guī)格:>95.0%(GC)1-Bromo-4-heptylbenzene (stabilized with Copper chip)
PANC-1, 人細胞 Human1-溴-4-正辛基苯(>98.0%(GC))質量規(guī)格:>98.0%(GC)1-Bromo-4-n-octylbenzene
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。