產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4329 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
寄生水霉PCR檢測試劑盒直銷 | Saprolegnia parasiticaPCR | BKP4329 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:寄生水霉PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
5-Aminouracil 中文名:5-氨基尿嘧啶 分子式:C4H5N3O2 度:98.0% 小鼠促甲狀腺素釋放激素(H)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Amoxicillin trihydrate 中文名:羥氨芐青霉素三水合物 分子式:C16H19N3O5S 度:98.0% 小鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
3-Amino-4-methylbenzamide 中文名:3-氨基-4-甲基苯甲酰胺 分子式:C8H10N2O 度:98.0% 小鼠促黃體激素(LH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-(2-Aminothiazole-4-yl)-2-methoxyiminoacetic acid 中文名:氨噻肟酸 分子式:C6H7N3O3S 度:98.0% 小鼠促卵泡素 英文名稱: Folliopin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: FSH
5-Aminoindazole 中文名:5-氨基吲唑 分子式:C7H7N3 度:98.0% 凋亡相關(guān)因子 英文名稱: apoptosis-inducing factor Fas 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Fas
土壤纖維素酶(S-CL)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣 4-Amino-3-hydroxybenzoic acid 2374-03-0 中文名:4-氨基-3-羥基苯甲酸 分子式:C7H7NO3 度:98.0%
土壤無機0(S-PHOS)含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 4-Amino-3-hydroxy-1-naphthalenesulfonic acid 116-63-2 中文名:4-氨基-3-羥基-1-萘磺酸 分子式:C10H9NO4S 度:98.0%
土壤無機0(S-PHOS)含量測試盒 可見分光光度法 50管/24樣 4-Aminoantipyrine 中文名:4-氨基安替比林 分子式:C11H13N3O 度:99.0%
土壤脫氫酶(SDHA)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣 4-Aminoantipyrine 中文名:4-氨基安替比林 分子式:C11H13N3O
土壤酸性蛋白酶試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣 4-Amino-2,5-dimethoxy-N-phenylbenzenesulphonamide 中文名:4-氨基-2,5-二甲氧基-N-苯基苯磺酰胺 分子式:C14H16N2O4S 度:99.0%
寄生水霉PCR檢測試劑盒直銷P3HR1細(xì)胞,人EBV陽性B瘤細(xì)胞 大鼠細(xì)胞株,DSL-6A/C1細(xì)胞 人小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞cDNAHA-c cDNA阿立哌唑-d8質(zhì)量規(guī)格:美國進口Aripiprazole-d8
NCI-H716(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2阿立哌唑-d8 (丁基-d8)質(zhì)量規(guī)格:美國進口Aripiprazole-d8 (Butyl-d8)
CoC1(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0142LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠氣管上皮細(xì)胞;RTE阿扎那韋-標(biāo)記d4質(zhì)量規(guī)格:美國進口Atazanavir - Labeled d4
中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO4'-羥基托莫西汀質(zhì)量規(guī)格:美國進口4'-Hydroxy Atomoxetine
PTPN2 Others Human 人 PTPN2 / PTPT 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 脫氯阿托伐醌質(zhì)量規(guī)格:美國進口Deschloro Atovaquone
PRLR Others Human 人 PRLR / Prolactin Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3,4-二羥基本酸100毫克
人內(nèi)根殼細(xì)胞總RNAHHIRSC NA對基-α-D-吡... 4-Nitrophenyl α-D-galactopyranoside 7493-95-0 100MG 通用試劑
VEGFA Others Rat 大鼠 VEGF164 / VEGFA 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1 JP-TS cVIcTION FUqL 6474-47-8
中國倉鼠卵巢細(xì)胞-二氫葉酸還原酶缺陷型;CHO/dhFr-偶氮脒類引發(fā)劑V401克2~8℃
NCI-H460[H460]細(xì)胞,大細(xì)胞細(xì)胞 人,H4細(xì)胞 小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;W6/322,4-二硝基扶本(劇毒)(陰涼)2,4-fluorobenzene