產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4226 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
【產(chǎn)品名稱】: 豬捷申病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
【英文名稱】: Porcine Teschovirus(PTV)RTPCR
【貨號(hào)】: BKP4226
【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運(yùn)輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制
酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
豬捷申病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
3,3'-Sulfonyldianiline 599-61-1 中文名:3,3'-二氨基二苯砜 分子式:C12H12N2O2S 谷胱甘肽過(guò)氧化物酶 英文名稱: glathione peroxidase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): GSH-Px
1,4-Bis[2-(4-methyl-5-phenyloxazolyl)]benzene 3073-87-8 中文名:1,4-二[2-(4-甲基-5-苯基惡唑基)]苯 分子式:C26H20N2O2 谷胱甘肽過(guò)氧化物酶 英文名稱: glathione peroxidase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): GSH-Px
Bis(3-ethyl-5-methyl-4-maleimidophenyl)methane 105391-33-1 中文名:雙(3-乙基-5-甲基-4-馬來(lái)基苯基)甲烷 分子式:C27H26N2O4 生長(zhǎng)激素結(jié)合蛋白 (P) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Bisphenol P 2167-51-3 中文名:雙酚P 分子式:C24H26O2 半乳糖凝集素 -3(Galectin-3) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
(+)-Noe's reagent 87248-50-8 中文名:(+)-核歐沃豪斯效應(yīng)試劑 分子式:C24H38O3 腦神經(jīng)相關(guān)生長(zhǎng)蛋白 -43(GAP-43) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
內(nèi)皮細(xì)胞合酶 (eNOS) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Oxandrolone 53-39-4 中文名:氧甲氫龍 分子式:C19H30O3
內(nèi)皮素受體A 英文名稱: Human Endothelin Receptor A 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): EA 2''-O-Acetylsprengerinin C 中文名: 分子式:C46H72O17
內(nèi)皮素 -1(Endothelin-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Oxandrolone 中文名:氧甲氫龍 分子式:C19H30O3
腺來(lái)源的內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 英文名稱: endocrine gland-derived vascular endothelial growth factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): EG-VEGF β-Sitosterol 83-46-5 中文名:β-谷甾醇 分子式:C29H50O 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 豆甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
內(nèi)啡肽 - b (Endorphin- b ) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Oxandrolone 53-39-4 中文名:氧甲氫龍 分子式:C19H30O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
T24-EGFP(CMV-EGFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人細(xì)胞 T24-EGFP (CMV-EGFP leiviral consuct stable sain) of human bladder cancer cells 1640+10% FBS氟吡禾靈(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Haloxyfop
IL12A Protein Human 重組人 IL12A / NKSF1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)吡蟲(chóng)啉(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%Imidacloprid
人平滑肌細(xì)胞 (HBVSMC)( 5×105 ) 人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 MCF-7(MCF7)(ATCC來(lái)源), 人癌細(xì)胞拉帕替尼質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Lapatinib base
CM-R049大鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL左炔諾孕酮質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP33,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Levonorgestrel
PROCR Others Rat 大鼠 Epcr / PROCR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 左炔諾孕酮(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Levonorgestrel
豬捷申病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)CCL13 Protein Human 重組人 CCL13 / MCP-4 蛋白 (His 標(biāo)簽)6α-羥基布地奈德質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口6α-Hydroxy Budesonide
MDA-MB-231(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 6β-羥基布地奈德質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口6β-Hydroxy Budesonide
豚鼠胚胎細(xì)胞;104C1亞葉酸鈣水合物質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Folinic acid calcium salt hydrate
CALR Others Human 人 CALR / Calreticulin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 喜樹(shù)堿鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 Camptothecin
腦成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)布比卡因堿,丁吡卡因質(zhì)量規(guī)格:>98%Bupivacaine base
PCR檢測(cè)試劑盒
豬捷申病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說(shuō)明書(shū)的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見(jiàn)白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。