產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4324 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
鼠傷寒沙門氏菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 | Salmonella typhimuriumPCR | BKP4324 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:鼠傷寒沙門氏菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
5-Amino-1-(2-hydroxyethyl)pyrazole 中文名: 分子式:C5H9N3O 谷胱甘肽—S轉(zhuǎn)移酶(GSH-ST)試劑盒(比色法)
5-Acetyl-3-chloro-10,11-dihydro-5H-dibenz[b,f]azepine 中文名: 分子式:C16H14ClNO 英文名稱: Total Niic Oxide 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: NO
5-[Bis(2-hydroxyethyl)amino]-1-methyl-1H-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester 中文名: 分子式:C18H27N3O4 自然殺傷細(xì)胞 英文名稱: Natural killer Cells 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: NK
5,6-Dimethyl-2-Benzothiazolamine 中文名:5,6-二甲基-2-苯并噻唑胺 分子式:C9H10N2S 結(jié)核分枝桿菌抗體 英文名稱: Mycobacterium Tuberculosis Aibody 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TB
5,6-Dihydro-6-methyl-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-one 中文名: 分子式:C8H8OS2 谷酰胺 英文名稱: ansglaminase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TG
天青B 1g 4,9-Dihydroxy-α-lapachone 56473-67-7 中文名: 分子式:C15H14O5 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 梓; 萘醌; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
特異性透明質(zhì)酸受體Layilin 英文名稱: hyalurona receptor Layilin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Layilin 4,4'-Diaminodiphenylsulfone 中文名:4,4'-二氨基二苯砜 分子式:C12H12N2O2S
糖原含量試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣 Trehalose 中文名:海藻糖 分子式:C12H22O11
糖原含量測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/48樣 Pemetrexed di 357166-30-4 中文名:培美曲塞二鈉 分子式:C21H23N5Na2O6 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
糖元染液 Pap stain (exfoliated cell staining) 4,6-Dichloro-5-nitro-2-propylthiopyrimidine 145783-14-8 中文名: 分子式:C7H7Cl2N3O2S 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
鼠傷寒沙門氏菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格PANC-1人細(xì)胞 Human pancreatic cancer cell line PANC-1 DMEM+10% FBS漢黃芩素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Wogonin
壞死因子蒿本內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Ligustilide
人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 (HAEC)( 5×105 ) BRL 3A, 大鼠肝正常細(xì)胞 Rattus和厚樸酚(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Honokiol
小鼠瘤細(xì)胞;EL4和厚樸酚(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Honokiol
TFRC Others Mouse 小鼠 TFRC / CD71 / ansferrin Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 癸氟奮乃靜(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定Fluphenazine Decanoate
HCT-8(人盲腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0402NCI-H520(人肺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 恒河猴腎細(xì)胞;MMK3錄化1公斤
人導(dǎo)管瘤細(xì)胞;BT-474姆沙伯W/AW-DMCS CHROMOSORB W/cW-DMCS
PDPN Others Mouse 小鼠 Podoplanin / PDPN 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鄰苯 o-Phenylenediamine (≥98%, OPD) 10G 通用試劑
CM-R022大鼠甲狀腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL錄化三本四氮唑沙保羅培養(yǎng)基25毫升2~8℃
Raw264.7, 小鼠單核巨噬細(xì)胞細(xì)胞 牛腎細(xì)胞,MDBK細(xì)胞 Hs 578Bst(人成纖維細(xì)胞)(D-基半乳糖)