產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4223 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
豬病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Porcine Rubulavirus(PoRV) RTPCR | BKP4223 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
3,3-Dimethoxy-5α-androstan-17-one 中文名:3,3-二甲氧基-5α-雄烷-17-酮 分子式:C21H34O3 度:98.0% 小鼠催乳素(PRL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17β-ol 中文名:3-乙氧基雄-3,5-二烯-17β醇 分子式:C21H32O2 度:93.0% 小鼠大內(nèi)皮素(BigET)ELISAKit ELISA. 96T/48T
17-Ethylendioxyandrosta-1,4-dien-3-one 中文名:17-亞乙二氧基-雄-1,4-二烯-3-酮 分子式:C21H28O3 度:95.0% 小鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISAKit ELISA. 96T/48T
3β-Acetoxy-5α-androstan-17β-ol 中文名:3-乙酰基-5α-雄烷二醇 分子式:C21H34O3 度:98.0% 小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
17β-Benzoyloxy-androsta-1,4-dien-3-one 中文名:17β-苯甲酰氧基-雄甾-1,4-二烯-3-酮 分子式:C26H30O3 度:98.0% 小鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
球蛋白IgM 英文名稱: immunoglobulin M 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: IgM Testosterone undecanoate 中文名:十一酸睪酮 分子式:C30H48O3
球蛋白 IgG(IgG) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Ponasterone A 13408-56-5 中文名:坡那甾酮A 分子式:C27H44O6
球蛋白 IgE(IgE) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Ponasterone A 13408-56-5 中文名:坡那甾酮A 分子式:C27H44O6 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 臺灣羅漢松; 蛻皮甾; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
球蛋白 IgA(IgA) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Ponasterone A 中文名:坡那甾酮A 分子式:C27H44O6
綿羊球蛋白G 英文名稱: Immunoglobulin G 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: IgG 3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17β-ol 中文名:3-乙氧基雄-3,5-二烯-17β醇 分子式:C21H32O2
豬病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)TE-13(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2炔孕酮/素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Ethisterone
HBdMEC Pellet 人膀胱微內(nèi)皮細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 胰酶/EDTA消化液T/E炔孕酮/素質(zhì)量規(guī)格:>98%Ethisterone
CL-0286M1(小鼠細(xì)胞)5×106cells/瓶×2D-胱氨酸質(zhì)量規(guī)格:0.98D-Cystine
HA Others H3N2 甲型 H3N2 (A/Victoria/210/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) D-阿拉伯糖醇質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRD(+)-Arabitol
人滋養(yǎng)層絨毛細(xì)胞cDNAHVT cDNA米吐爾(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCMetol
CEACAM5 Others Human 人 CEACAM5 / CD66e 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2,2'-雙(羥甲基)二苯(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)2,2'-Bis(hydroxymethyl)diphenyl Ether
人外根殼細(xì)胞RNAHHORSC miRNA5 μg雙(2-甲酰苯基)(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)Bis(2-formylphenyl) Ether
CFHR2 Others Human 人 CFHR2 / FHR2 / HFL3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1,3-雙(4-氨苯氧基)苯(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)1,3-Bis(4-aminophenoxy)benzene
人臍平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL4-氨基-4'-氯二苯(>97.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)(T)4-Amino-4'-chlorodiphenyl Ether
BRL大鼠Buffalo細(xì)胞,大鼠肝細(xì)胞 SH-SY5Y(神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 人肺粘液上皮樣癌細(xì)胞;NCI-H2921,4,8,12-四氮雜環(huán)十五烷(>97.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)1,4,8,12-Tetraazacyclopentadecane
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:豬病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。